9299.net
大学生考试网 让学习变简单
赞助商链接
当前位置:首页 >> 其它课程 >>

实验课考试内容

实验课考试内容


第一章
1、 何谓实验动物?实验动物学的研究内容?

实验动物:实验动物(Laboratory Animals)是指经人工饲育,对其携带微生物实 行控制,遗传背景明确或者来源清楚的用于科学研究、教学、生产、检定以及其 他科学实验的动物。 研究内容:实验动物生物学、环境生态学、遗传育种学、营养学、微生物学与寄 生虫学、医学、比较医学、动物实验技术、伦理学、实验动物福利、动物实验替 代方法。

2、3R的含义及拼写?
“3R”原则:为使动物权益得到保护,动物实验设计应遵循“3R”原则。即:替代 (Replacement) 、 减少 (Reduction)和优化(Refinement)为核心的“3R”运动。 3R运动的推进,最终将使实验动物的使用量逐渐减少,动物实验结果的准确性、 可靠性不断提高。

3、

何谓动物福利,动物的五大自由?

动物福利 (animalwelfare) :即维持动物生理与心理的健康与正常生长所需要的 一切事物。 动物权力(animalright):是指动物和人一样也有生的权利,逃离苦痛的权力, 人有解救动物的义务。 实验动物福利: 实验动物福利是指实验动物在肉体与心理上处于健康、康乐以及 舒适的状态。它包括实验动物繁育以及动物实验过程中的动物福利。 五大自由:(1)享有不受饥渴的自由;(2)享有生活舒适的自由;(3)享有不受痛苦 伤害和疾病威胁的自由;(4)享有生活无恐惧和悲伤的自由;(5)享有表达天性的 自由。

4、

实验动物在医学生物学中的地位和作用?

一、在医学生物学发展中发挥了重要作用:在医学生物学发展过程中,许多重要 的发现和研究成果,往往与实验动物及动物实验密切相关。巴甫洛夫指出,没有 对活动物的实验和观察, 人们就无法认识有机界的各种规律,这是无可争辩的事 实。 二、是现代医学生物学研究的重要支撑条件:在医学生物学研究领域里,进行实 验研究的条件可概括为AEIR四个基本要素。A是指Animal(动物)E是 Equipment(设备)I是指Information(信息)R代表Reagent(试剂)。 三、新的动物种系及模型动物为生物医学的发展开辟了广阔前景:1、免疫缺陷 动物的研究进展迅速,为人类恶性肿瘤异种移植及体外研究带来了生机。 小型动物------马、牛;单一T细胞缺陷------T、B细胞联合免疫缺陷 (SCID小鼠及T、B、NK 细胞三联免疫缺陷小鼠);自发突变先天性免疫缺陷 -----后天获得性免疫缺陷2、具有人类疾病模型特征的动物品系培育 自发性高血压(SHR)大鼠,癫痫大鼠、白内障小鼠、糖尿病小鼠等 3、基因敲除、转基因技术的应用 “肿瘤小鼠”“病毒感染小鼠”“人源化小鼠

四、在医学生物学、工农业等各个领域应用广泛 (一)医学生物学方面 (二)制药工业方面 (三)生物制品方面 (四)轻工业与食品工业方面 (五)农业和畜牧兽医方面 (六)国防和军事科学方面 (七)环保和地震监测等方面

5、实验动物科学发展史上的里程碑是什么?
在实验动物科学发展历程中,近交系(1909年)、无菌动物(1943年)的成功 培育和应用以及免疫缺陷动物 (1962年) 的问世是实验动物科学发展的里程碑。

6、我国实验动物法规建设如何?
1982年云南第一届全国实验动物工作会议。 1983年北京实验动物学会成立。 1987年中国实验动物学会成立。同年加入国际实验动物科学委员会(ICLAS)。 各省市相继成立了管理和学术机构。 国家、地方实验动物期刊杂志出版。 《中国实验动物学报》《中国比较医学杂志》 《实验动物与比较医学》 《实验动物科学》 1988年国家科委发布《实验动物管理条例》 1989年国家卫生部颁布了《医学实验动物管理实施细则》 农业部、国家药品监督管理局、总后卫生部先后制定相应条例。 1994 年国家技术监督局批准发布实验动物质量控制的《中华人民共和国国家标 准》。 1997年北京以立法的形式制定了《北京市实验动物管理条例》,同时颁布了三 个配套规章: 《北京市实验动物许可证管理办法(试行)》 《北京市实验动物质量检测机构管理办法(试行)》 《北京市实验动物从业人员培训考核管理办法(试行) 》 2001年12月6日国家科技部、 卫生部七部委联合发布 《实验动物许可证管理办法》 2002年5月1日开始实施第二版的实验动物国家标准。2011年开始实施第三版。 2002 年开始修订国家科委发布的《实验动物管理条例》 1992年中国与日本政府合作,开设了中国实验动物人才培训中心,由日本国际 专业协力团(JICA)资助派专家指导,开展培训实验动物人才工作。 2001 年首都医科大学、中国医科大学先后开办医学实验动物专业。

第二章

1.实验动物遗传学控制分类
一般近交系 重组近交系 近交系动物重组同类系 同源突变近交系 同源导入近交系 同基因型动物 杂交群动物(F1) 遗传限定动物

异基因型动物封闭群动物

2. 近交系的定义、特点及命名法?
近交系(inbred strain)是经连续20代以上全同胞兄妹交配(或亲代与子代交配) 培育而成, 近交系数应大于99%, 品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以 后代数的一对共同祖先。 近交系数:是指群体中某个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率。? 命名: 一般以大写英文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名, 符号应尽量简短。 如A系、BALB、TA1系、C3H。 特点:1.基因位点的纯合性 2.遗传组成的同源性 品系内所有动物个体都可追溯到一对共同祖先 3.表型一致性 4.长期遗传稳定性 5.遗传特征的可分辨性 每个近交品系都有自已的标准遗传概貌,选用适当的遗传监测方法,即可分辨各 个近交系。 6.遗传组成的独特性 每个近交系都具有独自的遗传组成和独自的生物学特性。 各品系间具有不同的基 因型和表型。 7.分布的广泛性 同一品系在不同地区不同国家都广泛存在,引种方便。 8.背景资料的完整性

3. 亚系、重组近交系、同源突变近交系、同源导入近交系 的定义和命名
亚系(substrain):在一个近交系内,因残余的杂合性或突变等原因,可导致

该系动物形成数个具有部分遗传组成差异的分支,称为亚系。 命名:亚系的命名方法是在原品系名称后另一道斜线(/),可以是以下四种: ①数字,如DBA/1、DBA/2等。②培育或产生亚系的单位或人的缩写英文名称。 如A/He,表示A近交系的Heston亚系。③当一个保持者保持的一个近交系具有两 个以上的亚系时,可在数字后再加保持者的缩写英文名称来表示亚系。如: C57BL/6J,C57BL/10J④一些建立及命名较早,并为人们所熟知的近交系、亚 系名称可用小写英文字母表示,如BALB/c、C57BR/cd等。 亚系和支系的形成原因: ①近交代数达40代以前形成的分支。20-40之间。 ②一个分支与其它分支分开繁殖超过100代。 ③基因突变,残杂合基因或遗传污染。

重组近交系(recombinant inbred strain RI)由两个近交系杂合后,经连续20 代以上兄妹交配育成的近交系。 命名:重组近交系的命名由两个亲代近交系的缩写名称中间加大写英文字母X命 名。 由相同双亲交配育成的一组重组近交系用阿拉伯数字予以区分。 如: 由BALB/c 与C57BL两个近交系杂育成的一组重组近交系,分别命名为CXB1、CXB2 …… 同源突变近交系(coisogenic inbred strain)是两个近交系,除了在一个指明位 点等位基因不同外,其他遗传基因全部相同。 同源突变近交系一般皆由近交系发生基因突变而形成。 命名:由发生突变的近交系名称后加突变基因符号(用英文斜体印刷体)组成, 二者之间以连接号分开,如:DBA/Ha-D。 同源导入近交系(congenic inbred strain)通过杂交--互交或回交等方式将一个基 因导入到近交系中,由此形成的一个新的近交系。 命名:同源导入系名称由以下三部分组成: (1)接受导入基因的近交系名称; (2)提供导入基因的近交系的缩写名称,并与前项之间用英文句号分开; (3)导入基因的符号(用英文斜体)与前项之间以字符分开。 如:B10.129-H-12b。表示该同源导入近交系的遗传背景为C57BL/10sn(=B10), 导入B10的基因为H-12b,基因提供者为本129近交系。

4.封闭群动物实验动物的定义、特点及命名法
封闭群(远交群)(Closed clony or outbred stock)是以非近亲交配方式进 行繁殖生产的实验动物种群, 在不从其外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖 4代以上。封闭群是一个与外界隔离的动物群体,不从外部引入新的个体,即不 引进新基因,同时避免近亲交配,不让群体内基因丢失。 特点:1.封闭群动物的遗传组成具有很高的杂合性。 2.封闭群动物具有较强的繁殖力和生活力。 3.突变种所携带的突变基因通常导致动物在某些方面的异常。 命名:封闭群由2-4个大写英文字母命名,种群名称前标明保持者的英文缩写名 称,第一个字母须大写,后面的字母小写,一般不超过4个字母。保持者与种群 名称之间用冒号分开。 如N:NIH表示由美国国立卫生研究院(N)保持的NIH封闭群小鼠。

Lac:LACA表示由英国实验动物中心(Lac)保持的LACA封闭群小鼠。

5.杂交群动物实验动物的定义、特点及命名法
杂交群(hybrids)是由不同品系或种群之间杂交产生的后代。两个不同近交系 杂交所生的第一代动物称为杂交一代动物(F1)。只是第一代,第二代就产生性 状分离。 特点:1.遗传和表型上的一致性广泛用于营养、药物、病原体和激素的生物评 估。2.杂交优势杂交一代具有较强的生命力,对疾病的抵抗力强,寿命较长, 容易饲养,适合于携带保存某些有害基因和长期慢性致死实验。3.杂合的遗传 组成同时具有两个亲本品系的特点,适用于免疫学和发育生物学等领域的研究。 4.可以作为某些疾病研究的模型。如C3H X IF1是肥胖和糖尿病的模型。 命名:雌性亲代名称在前,雄性亲代名称在后,二者之间以大写英文字母“X”相 连表示杂交。用括号括起来,在其后标明杂交的代数, 如:(C57BL/6 X DBA/2)F1 缩写:B6D2F1

第三章 1、普通级动物、清洁动物、SPF动物、无菌动物的概念。
CV:是不携带所规定的人兽共患病病原、动物烈性传染病病原的动物。如鼠痘病 毒、流行性出血热病毒等。普通级小鼠和大鼠等级被取消。 CL:是指除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大 的病原的动物。如鼠肝炎病毒、仙台病毒等。清洁动物有小鼠、大鼠、豚鼠、地 鼠、兔等动物。犬和猴没有清洁级。 SPF:是指除清洁动物应排除的病原和寄生虫外, 不携带主要潜在感染或条件致病 和对科学实验干扰大的病原和寄生虫。如绿脓杆菌等。 GF: 指在动物体上无可检出一切生命体。 悉生动物或已知菌动物(gnotobiotics) : 确知所带的其他生命体的实验动物叫已 知菌动物

2、 不同等级的实验动物对实验结果的影响。 GF SPF CL CV
传染病+ ++ ± 试验结果明确明确明确有疑问 用动物数少少较少多或大量 统计价值很好可能好较好不准确 长期实验好好可能好困难 死亡率很少少较少高 长期实验成活率100% 90% 80% 40% 实验标准设计可能可能可能不可能 结果讨论价值很高高较高有疑问

3、 人兽共患病、动物烈性传染病主要病原体的名称。
人兽共患病:指人类也可感染发病的一类动物疾病。 名称:(1)流行性出血热(2)弓形虫病(3)淋巴细胞脉络丛脑膜炎(4)沙门 菌病(5)狂犬病(6)猴B病毒(7)猴结核病 动物烈性传染病:(1)鼠痘(2)兔出血症(兔瘟)

4、 淋巴细胞脉络丛脑膜炎、鼠痘、狂犬病、流行性出血热 等疾病的传染源、传播途径、易感者和症状表现。

淋巴
传染源

鼠痘

狂犬
主要是犬、其次 是携带病原的 猫、猪及牛、马 等家畜和野兽 等温血动物。自 然界中,以野生 动物如狼、狐、 吸血蝙蝠等为 主。

出血热
主要是野鼠,以 黑线姬鼠和褐 家鼠为代表,可 在实验大鼠等 啮齿类动物中 流行。近年发 现,该病毒可由 实验大鼠传播 给人。 主要是动物源 性传播,在野外 主要是黑线姬 鼠和褐家鼠感 染大鼠。受感染 的大鼠可向外 界排毒,污染环 境,污染尘埃飞 扬形成气溶胶 吸入感染被认 为是主要的传 播途径。

感染LCM病毒 病小鼠、无症状 的野小鼠、无症 带病毒小鼠。 状带病毒小鼠。

途径

接触带病毒野 小鼠或实验小 鼠的分泌物、排 泄物、吸血 昆虫传播,以及 胎盘垂直传 播等。

接触病鼠患处 主要通过 渗出液、分泌物 咬伤传播,也可 及其污染物品。 由带病毒 唾液经各种伤 口和抓伤、 舔伤的黏膜和 皮肤入侵。

易感者

小鼠、 猴、 豚鼠、 大鼠、地 鼠、兔、狗等, 人亦易感。

小鼠、 尤其是A、 人、各种畜类, 主要是人,其次 C3H、DBA/2、 尤其是犬科和 为大鼠、小鼠、 BALB/c、CBA等 猫科的动物。 豚鼠、兔等实验 品系。幼鼠和衰 动物。动物感染 老小鼠对本病 后可不发病,而 特别易感,且常 人则发病。 呈致死性。但本 病在野鼠中较 少发生。 小鼠肢体和尾
动物:犬狂暴型、

症状

在实验动物多

人感染后出现

呈隐性感染,小 鼠感染后可不 出现症状。人感 染后表现类似 流感样症状,严 重者侵犯中枢 神经引起脑膜 炎等。

巴严重水肿、溃 疡,最后坏死脱 落,故称脱脚 病。

犬麻痹型。 人感染后的临床表 现:恐水、怕风、 恐惧不安、咽肌痉 挛、进行性瘫痪, 甚至死亡。

头痛、眼眶痛、 腰痛等 “三痛”症状, 脸、 脖子、胸部红肿 等“三红”体征, 经过低血压期、 少尿期甚至尿 闭期,最后到多 尿期。有发热、 头痛等类感冒 症状,个别病例 严重时并发急 性心力衰竭,可 导致死亡。

第四章

1、

实验动物营养学的概念。

是研究饲料营养供给与实验动物机体对营养物质需求之间的关系, 并从中找出规 律,用以进行各种实验动物科学饲养的一门学科。

2、 3、 4、

实验动物饲料含的六大营养成分。 体内不能合成维生素C的实验动物有哪些。 啮齿类、兔、犬和猴的营养需要。

一般都含有水分、蛋白质、脂类、碳水化合物、矿物质及维生素六种营养物质

豚鼠和猴体内不能合成维生素C ,须由饲料供给。

大鼠、小鼠饲料蛋白质占18%左右,粗纤维5%,粗脂肪4-8%。维生素A需求量为 每公斤饲料含7000-14000IU,通常以加入1%的清鱼肝油来满足。应适当补充维生 素E,每公斤饲料含60-120IU,以提高受孕率。 金黄地鼠饲料蛋白质占21%~24%,动物性蛋白应含相当比例,主要来源于鱼粉和 鸡蛋。植物性蛋白主要来源于黄豆和豆粉。此外, 应喂饲一些白菜、萝卜、黄瓜 等青饲料。 豚鼠饲料蛋白质占17%-20%左右,尤其对精氨酸的需要量较高。由于它的盲肠较 发达,因而对纤维素亦有较高需要,应占饲料总量的10%-15%左右。豚鼠体内不 能合成维生素C,因此要在饲料中添加。一般每公斤饲料含维生素C 1500mg,妊 娠豚鼠每公斤饲料含维生素C 1800mg。实际喂养时,主要可喂饲苜蓿草粉、干草 粉和(或)绿色蔬菜等。

兔:新生家兔一般要哺乳一个月左右才能开始吃饲料。家兔饲料中蛋白质应占

14%-17%,粗脂肪占3%,粗纤维占10%-15%以上。饲料中应含大量干草,以补足其 对粗纤维的基本需要量,从而可防止家兔因粗纤维摄入不足而导致腹泻。

犬为肉食性动物,其饲料中应含20~24%蛋白质,4.5%-6.5%粗脂肪,3%粗纤维。
注意添加维生素A、D、B1、B2, 特别是维生素E。

猴为杂食性动物,其饲料中的蛋白质应占16%~21%,粗脂肪4%~ 5%。猴体内
不能合成维生素C,其需求量为每公斤饲料含1700-2000mg,因而要注意补充。 在人工喂养时,应以面粉、鸡蛋、食盐、骨粉制作的蛋糕或饼干作为主食,此外 还应有苹果、香蕉、蔬菜等作为辅食。 蛋白质 18% 脂肪 4-8 粗纤维 5 其它
维生素A需求量 为每公斤饲料 含 7000-14000IU, 通常以加入1% 的清鱼肝油来 满足。应适当补 充维生素E,每 公斤饲料含 60-120IU,以提 高受孕率。 动物性蛋白应 含相当比例,主 要来源于鱼粉 和鸡蛋。植物性 蛋白主要来源 于黄豆和豆粉。 此外, 应喂饲一 些白菜、萝卜、 黄瓜等青饲料。

大鼠、小鼠

金黄地鼠

21-24%

豚鼠

17-20%

10-15

一般每公斤饲 料含维生素C 1500mg, 妊娠豚 鼠每公斤饲料 含维生素C 1800mg。 实际喂 养时,主要可喂 饲苜蓿草粉、干 草粉和(或)绿色

蔬菜等。 精氨酸的需要 量较高



14-17%

3

10-15

哺乳一个月左 右才能开始吃 饲料 维生素A、D、 B1、 B2, 特别是 维生素E 维生素C每公斤 饲料含 1700-2000mg



20-24

4.5-6.5

3



16-21

4-5

5、常用的实验动物饲料消毒灭菌方法。
干热灭菌法(100℃蒸汽) 高压蒸汽灭菌法(120℃,20min) 放射线灭菌法(钴60)

第五章 1、实验动物的环境、外环境和内环境的概念?
实验动物的环境: 是人工控制的, 供实验动物繁殖、 生长的特定场所及有关条件, 即围绕实验动物的所有事物的总和。 外环境:是指实验动物和动物实验设施以外的环境。 内环境:是指依科研要求和人们的意愿,将实验动物的生长、繁殖或活动限定在某种特定
的人工场所范围内称之内环境。内环境又分为大环境和小环境。

2、以R=(A+B+C)×D+E说明环境控制的重要性。
R —实验动物的总反应; A —实验动物种的共同反应; B —实验动物品种、品系的特有反应; C —实验动物的个体反应(个体差异); D —环境影响; E —实验误差。 D与R呈正相关,在实验动物的遗传性状相对稳定的前提下,须尽量减少环境D变 化的影响。如果环境条件控制不好,实验结果就难以稳定一致,甚至导致错误结 论。

3、影响实验动物的环境因素有哪些? 一、气候因素: 温度、湿度、风速
(一)温度对实验动物的影响 啮齿类动物为18-29℃。

1.影响生长发育和繁殖 2.影响代谢 3.影响健康与抗感染能力 4.激发应激反应 5.影响实验结果 (二)湿度对实验动物的影响 高温高湿: 代谢紊乱、抵抗力下降,发病率、死亡率增加(实例:卵蛋白引起小 鼠过敏性休克)、85-90%的高湿环境有利于病原微生物存活和传播、饲料霉变 等。 湿度过低: (1)室内干燥、灰尘飞扬,容易引起实验动物呼吸系统疾病。 (2)大鼠发生环尾病(温度27℃,相对湿度低于40%)。 (3)某些母鼠拒绝哺乳,甚至吃仔鼠。 (三)气流和风速
人类一般可感觉的气流速度为0.2-0.25m/s,而实验动物以0.13-0.18m/s为最佳。

二、理化因素: 光照、噪声、粉尘、有害气体、消毒剂、杀虫剂
(一)光照对实验动物的影响 1.影响视力 鸟类视觉细胞以视锥细胞为主,适应强光。而啮齿类动物视觉 细胞则以视杆细胞为主。强光会损害实验动物特别是啮齿类的视力,并使其辨 色能力下降。 2.影响生理及生殖机能 照明对实验动物的生理机能,尤其生殖 和行为有明显影响。 持续黑暗使大鼠卵巢和子宫的重量减轻, 生殖过程受抑制。 而持续光照会过度刺激动物的生殖系统,可连续发情。 (二)噪声对实验动物的影响 小鼠能听到频率为1000-50000HZ的音响,人类只能听到1000-2000HZ的范围。 1.影响神经及心血管等系统功能 烦躁不安、血压升高、肾上 腺皮质酮增高等。DBA/2幼鼠在持续高分贝噪声环境可发生听源性痉挛,甚至死 亡。 2.影响消化及内分泌系统功能 强噪声通常使动物导致消化系 统功能紊乱。大鼠在噪声环境中,表现摄食量增加,但体重反而下降。 3.影响繁殖及幼小动物生存 过强噪声可导致动物交配率降低。 使母鼠流产、拒绝哺乳,甚至吃仔。 (三)粉尘 粉尘是指空气中浮游的固体微粒。 动物室的粉尘来自未经过滤的空气、室内的 动物皮毛、排泄物、饲料屑及垫料等。 粉尘的危害:过敏原和病原微生物的载体。。 屏障环境的空气洁净要求达到10 000级,隔离环境的空气洁净要求达到100 级。 (四)有害气体 由动物粪尿发酵分解产生的氨、硫化氢、硫醇等特殊气味有害气体。其中, 氨的浓度作为判断有害气体污染程度的指标。以mg/m3表示。氨浓度应低于 14mg/m3

三、居住因素
(一)笼器具 应选用标准的无毒、耐腐蚀、耐高压、易冲洗、易消毒灭菌的耐用材料制 成的笼具,并应符合动物生理生态及防逃逸的要求。 最小面积应符合国家标准要求。 (二)垫料 垫料应使用标准的无毒、 无异味、无油脂、吸湿性强, 粉尘少的材料,经消毒或灭 菌后使用。 三)饮水 普通级动物一般饮用符合卫生标准的自来水即可,但清洁级以上动物必须饮用 经酸化无菌、高压灭菌或超滤去菌的水。

四、生物因素
(一)空气中的微生物 空气中微生物的含量是实验动物环境重要的检测指标。分为致病性和非致病性 两类 。常常以空气落下菌数表示,普通环境小于或等于30个/皿,屏障环境小 于或等于3个/皿,隔离环境无检出 。 (二)社会因素 实验动物社会因素是指在某个种属中,实验动物个体在其动物种群中的优劣与 社会地位,及饲养密度等。饲养密度可对实验动物的社会造成明显影响。单独 饲养,如狗在长期毒性实验时,也会引起生理和行为的变化。

4、国标中对实验动物小鼠动物实验屏障设施的温度、湿度、噪声有 哪些要求? 20-26摄氏度,40-70%,小于等于60dB

第六章 1、屏障设施的概念?
是指一个相对密闭的实验动物设施环境,设有恒温、恒湿和除菌换气系统。要求 送入空气的洁净度达10000级,室内保持正压,具有严格的微生物控制系统,用 以饲养清洁级或SPF级动物。

2、屏障设施运行的四要素有哪些?各有何特点?
人、物、气、动物 人员流程: 准备室→更衣→淋浴→更无菌衣→风淋→清洁走廊→动物室→缓冲间 →屏障外。

?物品流程: 洗刷包装室→灭菌室→洁净贮存室→洁净走廊→动物室→缓冲间→ 污物处理室→洗刷包装 ?动物流程:①入屏障:屏障外→传递窗→洁净库→观察室→饲养室②出屏障: 饲养室→洁净库→传递窗→屏障外 气:经初、中、高三级过滤

3、常用的小型独立实验动物设备有哪些?
小型独立实验动物设备是指可移动的微生物控制独立装置。主要是指隔离器、超 净台、层流架和独立供气动物笼系统等。

4、在无人协助的情况下你如何应用清洁级小鼠在实验动物 屏障设施内进行动物试验?
工作人员进入洁净区之前必须把在洁净动物房使用的消毒好的物品和用具放在 消毒柜或缓冲间(传递舱) ,以便进去后使用。 在第一更衣处换拖鞋、 脱外衣、 脱内衣裤→淋浴室洗头、 身体、 双手、 双脚等 (5—10 分钟)→进入第二更衣室,先用消毒过的毛巾擦干身体,然后带上洁净口罩和帽 子, 穿洁净内衣裤, 穿洁净工作服→双手浸泡在消毒桶内五分钟以上或戴上消毒 手套→风淋室风淋三分钟→洁净走廊→饲养室。 工作人员按规定进入清洁走廊后, 去消毒后室把当天使用的东西放在运输车上一次推到饲育间。 清洁区工作人员工作完毕后把废弃物、 用过的用具和笼具一同整理装车 (运输车) 推出房间, 进入污染走廊并随手锁门。工作人员把运输车推入缓冲间后撤回污染 走廊,经由人流缓冲间通道返回一更间,随手关好缓冲间门,进行更衣;将穿过 的消毒服置放一更室指定地点,待重新洗涤消毒处理。离开清洁区时必须锁门

第七章
1. 小鼠: (一)习性和行为: 1、胆小怕惊;2、昼伏夜动;3、喜群居;4、适应性差;5、喜啃咬;6、寿命 短(2-3年)。尾长与体长相等,尾部复有短毛和环状角质鳞片。 2、体型: 出生时体重:1.5g,体长2cm,1-1.5月龄达18-22g,最重达30-40g。 体长11cm。

3、骨:头骨、躯干骨、前后肢骨。 4、牙齿:每侧上、下颌各有门齿1个,臼齿3个。 5、消化系统:食管长2cm;胃分为前胃和腺胃。胰腺分散。 6、白化小鼠怕强光。对各种毒素和病原体易感。对致癌物敏感,有自发性肿瘤 系。 (三)生理学特点: 1、生长快:各品系小鼠达到18-22克体重所需时间: (1)昆明种小鼠4周,(2)NIH小鼠4-4.5周,(3)615小鼠4-5周,(4) C57BL/6小鼠5-6周,(5)C3H小鼠6-7周,(6)BALB/c小鼠7-8周。 6、呼吸系统:左肺单叶,右肺4叶。7、生殖系统:雌鼠有“Y”形双子宫,乳腺5 对。8、淋巴系统:发达,性成熟时胸腺最大。9、骨髓:无黄骨髓。 10、皮肤:无汗腺。 (5)妊娠期:19-21天。(6)哺乳期:20-22天。(7)产仔数:8-15只。 (8)产后性期:产后24小时内。 2、生殖生理: (1)性成熟期:1.5-2个月。(2)体成熟期:2.5-3个月。 (3)性活动维持时间:1年。(4)性周期:4-5天 雄鼠生殖器官中有凝固腺,交配后可分泌腺液并凝固于雌鼠阴道和子宫颈内,形 成阴道栓。 3、尾巴的功能:散热及维持平衡。 4、成年小鼠生理数据: 胃容量:1.0-1.5ml,食料量:2.8-7.0g/d,饮水量:4-7ml/d, 排粪量:1.4-2.8g/d,排尿量:1-8ml/d。 二、小鼠的选择 1.首先要考虑小鼠是否符合国家标准。 2.按照实验目的和要求来选择。 3.不同季节和昼夜不同时间,动物机体反应性有一定改变

4.不同种、同种而不同品系的小鼠对同一实验处理反应有很大差别。 5.年龄应尽可能一致,体重应大致相近,一般不应相差10%。 6.小鼠性别,在实验研究中,如无特殊要求,一般宜雌雄各半,以避免由于性 别差异而造成的误差。有些药物的作用不受性别影响,则可不分雌雄,任意迭用 一种性别。 7.生理状态和健康情况,小鼠处于怀孕哺乳等生理状态时,对外界刺激的反应 常有变异,如无特殊的实验目标管理的,不得混入,以减少个体差异。 三、小鼠在生物医学中应用 (一)安全性和毒性试验 (二)生物学效应测定和药物效价比较 (三)药物的筛选 (四)微生物、寄生虫病原学研究 (五)放射学研究 (六)肿瘤学研究 (七)计划生育的研究 (八)镇咳药研究 (九)转基因研究 (十)遗传性疾病研究 (十一)老年医学研究 (十二)免疫学研究 1.各种药物筛选性试验;如镇咳药物的筛选 2.药物效果及其副作用研究,如: 利用声源性惊厥小鼠来评价抗痉挛药物; 利用小鼠角膜和耳廓反射评价镇定药物; 小鼠常用于药物对疾病疗效试验。 3.毒性试验和安全分析,如: 急毒、慢毒、半数致死量的测定等试验 1. 近交系小鼠自发性肿瘤进行研究,如AKR小鼠白血病发生率可达90%,C3H小 鼠乳腺癌发病率达97%。而C57BL小鼠乳腺癌发病率极低。结果表明C3H体内 有一种乳汁因子会传给雌性子代,在该乳汁因子与激素的共同作用下易乳腺 2. 二乙基亚硝胺可诱发小鼠肺癌; 3. 甲基胆葸可诱发小鼠胃癌和宫颈癌等; 4. 感染小鼠白血病病毒可诱发白血病; 5. 感染人类腺病毒可诱发小鼠肉瘤及淋巴瘤。 裸小鼠是无胸腺属于免疫缺陷小鼠,可进行异体肿瘤移植。 目前已移植人体肿瘤达40种以上。 SCID小鼠生理特征为既缺少T细胞、也缺少B细胞,血清中 缺少免疫球蛋白,属于严重联合免疫缺陷小鼠,可进行异 体肿瘤移植。 单克隆抗体最早通过BALB/C小鼠生产。 不宜行:研究体温变化的试验:因为小鼠体温变化不稳定 ?慢性支气管炎的试验:因为小鼠气管及支气管腺不发达

?催吐试验:因为小鼠无呕吐反应 ?动脉粥样硬化试验:因为小鼠不易形成动脉粥样硬化 四、常用品种品系名称: (一)近交系: 1、BALB/c,白色。2、C57BL,黑色。3、C3H,野鼠色。4、DBA,淡棕色。 5、A系,白色。6、AKR,白色。7、CBA,野鼠色。8、TA1和TA2,白色。9、 615,深褐色。 (二)封闭群:均为白色。 1、昆明种(KM)。 2、NIH。 3、ICR。 4、LACA。 (四)突变系动物(mutant strain animal) 突变系动物——由自然变异或人工致畸,使正常染色体上的基因发生突变,而具 有某种遗传缺陷或某种独特遗传特点的动物。 1. 裸小鼠:第11对染色体突变,无毛。 2. SCID小鼠: 严重联合免疫缺陷小鼠。 第16号染色体上的scid隐性基因突变所致, 出现T、B淋巴细胞免疫功能缺陷。 3. 快速老化模型小鼠(SAM小鼠):4-6个月后迅速出现老化诸特征。

大鼠:(一)一般特性 性情温顺,行动迟缓,但抓取方法粗暴时也很凶残,常咬人。嗅觉发达,味觉很 差,食性较杂。喜居安静环境,夜间活跃。对外界刺激反映敏感。适应力较强, 容易饲养。对维生素、氨基酸缺乏敏感。大鼠对空气的湿度耐受力较差。空气中 的湿度低于40%,大鼠易发生环尾病。大鼠无胆囊,肝脏再生力强。鼠汗腺少, 尾是主要散热器官。 胸部和近腹沟各3对乳头。 大鼠胰腺组织分散, 形状不规则。 垂体较松地附在漏斗下部。胃内有一条皱折,收缩时会堵住喷门口;不会呕吐。 雌性生殖器呈圆形,子宫呈Y型。 性成熟:60天性周期:4~5天妊娠期:21天哺乳期:21天 体温: 37.5℃心率: 380 (300~500) 次/分血压: 12~15.40Kpa (90~116mmHg) 呼吸率:90(63—179)次/分 血液指标 血红蛋白:148(120~175)g/L红细胞数:8.9(7.2~9.6)?1012/L 白细胞数:14(5~25)?109/L血细胞比容:0.46(0.39~0.53)L/L

大鼠无胆囊,但胆总管较大,可经胆总管收集胆汁,研究消化功能等。 大鼠对营养缺乏比较敏感,可发生典型的症状,是营养学研究首选的实验动物。 大鼠广泛应用药理研究。各种药物的毒理学研究和药物依赖试验等。血压和血管 阻力的变化对药物作用敏感,适合研究心血管药物的筛选。 心血管疾病药物的药效评价: 大鼠的血管阻力和血压对药物的反映均很敏感,与 人类或大动物的反映均较一致。例如SHR大鼠是研究高血压药物的极好的动物模 型。 (四)肿瘤学研究 (五)遗传学研究(六)传染病研究(七)生物制品安全评价和毒性试验(八) 牙科学研究 可用来研究龋齿的防治方法 (九)老年医学 因寿命相对短,体形大,有足够的血液或体液可供测试。达到老年的标志是在 50%的存活率时。Sprague-Dawley(SD)大鼠为14个月,Wistar大鼠24-30个 (十)行为学研究 利用大鼠对新环境易适应,有探索性,易训练,对惩罚和暗示敏感等特性进行行 为学研究和高级神经活动的研究。 1、迷宫试验 利用迷宫试验测验大鼠的学习和记忆能力。 2、奖励和惩罚试验 采用跳台试验等方法,测试大鼠记忆判断和回避惩罚的能力。 (一)近交系1.F344/N2.Lou/CN 3.其它近交系大鼠: ACI、 AGUS、 BN、 CAS、 LEW、M520、WKY/Ola、WN/N等。 ) (二)封闭群Wistar大鼠SD(Sprague Dawley, SD) 大鼠Long-Evans大鼠其 它封闭群大鼠: Osborne-Mended、 Sherman、 August、 Brown-Norway 等 (三)突变系1.SHR/Ola大鼠2.癫痫大鼠3.裸大鼠(nude rat (四)新生仔鼠周身无毛、耳贴在头部皮肤上,无牙、肤色赤红,3~4 d长出体 毛;8~10 d开始爬行;14~17 d开眼;16 d被毛长齐;寿命一般为2.5~3 年。易患慢性呼吸道疾病,雄鼠比雌鼠体型大。雌鼠体型较小。

豚鼠
(二)一般特性 1.性情温和,喜欢群居。 2.生性好动,胆小怕惊。 3.对温湿度的变化敏感。

4.母豚鼠妊娠后期易流产。 5.体内缺乏左旋葡萄糖内酯氧化酶,不能合成维生素C。 6.对饲料改变敏感。 7.爱吃含纤维质较多的禾本科嫩草。 8.有速发型和迟发型超敏反应,对抗菌素敏感。 (一)变态反应的研究 易致敏,首选实验动物。顺序是:豚鼠﹥家兔﹥犬﹥小鼠>猫>蛙。连续两次注 射抗原后, 豚鼠会有规律的形成急性典型休克, 支气管平滑肌收缩, 发绀, 虚脱, 呼吸困难,继而死亡。 (二)营养学研究 是维生素C研究的重要动物。饲料缺乏时,出现一系列坏血病症状,是唯一用于 实验性坏血病的动物。 此外, 还可以研究叶酸、 硫胺素、 精氨酸和钾等营养成分。 (三)传染病学研究 豚鼠对很多致病菌和病毒十分敏感。尤其对结核杆菌高度敏感,感染后病变类似 于人,是结核研究最佳动物模型。 (四)药理学研究 豚鼠对某些药物极为敏感,因此是研究这些药物的“专门动物”。例如豚鼠对组织 胺极敏感,所以很适合做平喘药和抗组织胺药的研究; 豚鼠妊娠期长,适用于药物或毒物对胎儿后期发育影响的试验; 豚鼠对多种抗生素类药物非常敏感,是研究抗生素和青霉素的动物模型; ?豚鼠可用于研究麻醉药及镇咳药的药效实验; ?豚鼠对人型结核杆菌具有高度的敏感性,因此常用做抗结核病药物的药理学研 (五)生理、毒理学研究 适合观察出血和血管通透性变化。还适于作缺氧耐受性和测量耗氧量实验。 (六)悉生生物学研究 豚鼠是最早获得无菌动物的实验动物,在悉生生物学方面有较大价值。 (七)补体结合试验 补体与免疫反应有关,广泛用于血清学诊断。豚鼠血清溶血补体活性最高,其血 清是补体的主要来源。 (八)毒物对皮肤局部作用实验 豚鼠和家兔皮肤对毒物刺激反应灵敏,其反应近似于人。 (九)实验性肺水肿实验 切断豚鼠颈部两侧迷走神经可以复制典型的急性肺水肿动物模型, 症状比其他动 物更明显。 (十)内耳疾病的研究 豚鼠的耳窝管对声波极为敏感。常选用豚鼠进行若干内耳疾病的研究。 (十一)疾病的实验诊断 对人和牛型结核杆菌敏感,常用于结核病的诊断。腹腔是天然滤器,抗微生物感 染功能很强,可分离鹦鹉热和立克次体。

不宜采用豚鼠的研究
1.急性实验。因为豚鼠易感染,皮肤厚,不宜注射,血管神经不易分离; 2.慢性支气管炎症实验。因为豚鼠气管、支气管腺体不发达; 3.呕吐实验。因为豚鼠呕吐反应不敏感。 家兔: 家兔在生物医学中的应用 一般指标:性成熟:5~8个月 性周期:3~5天,刺激性排卵。 妊娠期:30~33天 哺乳期:42(40~45)天 体温:39.0(38.5~39.5)℃ 心率:250(250~300)次/分 血压:15(13~17)Kpa〔112(97~127mmHg) 呼吸率:53(38~60)次/分 (一)免疫学研究 (二)各种制品的鉴定 (三)皮肤反应实验 (四)眼科研究 (五)生殖生理和避孕研究 兔属刺激性排卵, 可准确检测排卵时间并容易取得胚胎材料。可用于避孕药和生 殖生理研究。 (六)微生物学研究 (七)心血管和冠心病研究 (八)急性动物实验 (九)胆固醇代谢和动脉粥样硬化症的研究 对致病胆固醇的敏感性高,造型时间短,成型快。兔的模型有高脂血症、主动脉 粥样硬化斑块、冠状动脉粥样化病变,与人类病变基本相似。 兔造模比较经济。

不宜:1.观察呕吐的试验,因为兔对呕吐反应不敏感;
2.放射病试验,因为兔对射线非常敏感,射线照射后

常发生休克或死亡; 3.咳嗽试验,因为兔缺乏咳嗽反射; 4.甲状旁腺切除术,因为兔的甲状旁腺分布分散,位置不固定。 饲料应来源于有许可证厂家生产的兔颗粒饲料。每天成兔200g,防止暴食

犬:一般特性
视力不发达。 视角仅为25°以下, 正面近距离看不到, 测距性差, 视力仅为20~ 30 m。视网膜上没有黄斑,即无清楚的视觉点。犬无色觉,红绿色盲。犬的听 觉极为灵敏,可听到3.5?104 Hz。犬的嗅神经极为发达,鼻粘膜布满嗅神经末 梢。鼻好、耳好、眼不行 (一) 实 验外科学研究广泛用于实验外科各个方面的研究,如心血管外科、脑外科、 断肢再植、器官或组织移植等。临床外科医生在研究新的手术或麻醉方法时 往往是选用狗来作动物实验,先取得熟练而精确的技巧,然后才妥善应用于 临床。 二)慢性实验研究由于犬可以通过短期训练很好地配合实验 (三)基础医学实验研究而且心律失常多 (四)药理学、毒理学和药物代谢研究如磺胺类药物代谢的研究、各种新药临床使 用前的毒性实验等均可用犬来进行研究。 (五)营养学和生理学研究如蛋白质营养不良、 家族性骨质疏松、 视网膜发育不全、 高胆固醇血症、动脉粥样硬化、糖原缺乏综合征等研究。 (六)肿瘤学研究如制作淋巴肉瘤、甲状腺肿瘤,血管肿瘤等动物模型。 常用品种、品系1.比格犬 2.四系杂交犬3.冠毛犬 4.墨西哥无毛犬5.Boxer犬 6.黑白花斑点短毛犬 检疫做好隔离检疫工作,新购入犬需有检疫和注射狂犬疫苗证明,隔离饲养 21-26d,此期间做临床观察和血液检查、驱虫等工作,对没有注射狂犬疫苗的要 补注射

猕猴
主要分布在非洲、 亚洲热带、 亚热带区域。 欧洲、 北美洲和澳洲不产灵长类动物。 ⑶杂食,以素食主。需食物中维生素C。 二、猕猴在生物医学中的应用 非灵长类动物的遗传物质有75%-90%与人类同源。是基础医学和临床前研究的 理想动物模型。主要用于: 1、传染病学研究 能感染人类所有传染病,包括病毒性、细菌性及寄生虫。如:AIDS病毒、流感、

弓形虫、结核杆菌等。 2、心血管与老年病 病理、生理、代谢等与人类非常相似。 如:高胆固醇饲料 3、生殖生理研究 ⑴人类避孕药物的极为理想的动物模型 ⑵生殖生理基础研究。 4、环卫公害研究 ⑴大气污染的动物模型。矽肺 ⑵重金属污染模型。铅污染 ⑶农残留物污染模型。 5、药理毒理学领域 6、肿瘤学领域 7、器官移植的研究。白细胞抗原RhLA是研究灵长类动物主要组织相溶性复合 体基因领域的重要对象之一。与人类的相似,具有高效多态性。 饲喂食物由谷类主食和瓜菜等组成,但也需一些动物性食物,如蛋类、鱼粉、牛 奶等。饲料中应含有足够的维生素C和矿物质,成年猴需食物113-907g/d,饮 水必须全日满足,饮水量成年猴平均约20-950ml/d。 环境最适温度为20 -25℃,相对湿度40 -60%

?

属典型的刺激性排卵动物, (1)对机械刺激或化学刺激敏感,对气体或蒸汽反应 很敏感。 (2)猫对所有酚类都敏感。 (3)吗啡对猫表现为中枢兴奋,而对犬、 兔、大鼠、猴等主要表现为中枢抑制。4. 呕吐反射呕吐反射敏感。 6. 红细胞折射体猫红细胞边缘有一环状灰白结构,称为红细胞折射体,约10% 的红细胞中有红细胞折射体。6. 血型有A、B、AB三种血型。7. 成年猫生理 数据胃容量:约340ml,食料量:113 -227g/d,饮水量:100 -200ml/d,排粪 量:56.7 -227g/d,排尿量:20 -30ml/kg/d。 二、在生物医学研究中的应用 1、神经系统研究(去大脑僵直) 2、药理学研究(缩、扩瞳药物) 3、疾病动物模型 4、其他研究(针麻) 仓鼠: 仓鼠属昼伏夜行动物。? ?不敏捷,易被捕捉。

?具有很强的储存食物习性。? ?受惊或被激怒时会咬人。? ?牙齿十分尖硬。? ?仓鼠好斗,雌性躯体比雄性大且凶猛。 ?仓鼠易熟睡,常有食仔癖。 口腔内两侧各有1颊囊用以储存食物。但颊囊缺乏腺体和完整的淋巴灌流通路; 植入其内的异种组织不引起免疫排斥。 睾丸部相当大,占体长1/6~1/7,上端有两块大的积液囊。 中国仓鼠在解剖上有些不同,如无胆囊, (一)肿瘤移植、筛选、诱发和治疗等研究 地鼠的颊囊可移植正常组织或肿瘤的组织细胞,适用于肿 瘤增移殖、筛选、诱发和治疗的研究。金黄地鼠无原发性肺肿 瘤,最适合诱发支气管肺癌和肺肿瘤。 (二)生殖生理和计划生育研究 成熟早,动情周期准确,可确切得知其怀孕日期,妊娠期 短,繁殖快,适用于生殖生理和计划生育的研究。 (三)血管生理学和微循环研究 地鼠的颊囊黏膜薄、色淡、透光性好,微血管致密、清晰, 适合观察淋巴细胞、血小板、血管反应,是进行血管生理学和微 循环研究的很好的动物模型。 (四)营养学研究 地鼠对维生素缺乏敏感,可应用于维生素B2,A ,E缺乏症的 研究。 (五)传染病研究 自发传染病少,但实验诱发疾病很容易。可用于多种细菌、 病毒和寄生虫研究,如,狂犬病毒、乙型脑炎病毒的研究及其疫 苗的生产与小儿麻疹病毒研究等。

猪:猪为杂食性动物,性格温顺,易于调教。
2.喜群居,嗅觉灵敏,有用吻突到处乱拱的习性。 3.对外界温湿度变化敏感。 4.猪和人两者的皮肤组织结构相似,脏器重量、齿 象牙质和齿龈的结构也相似。 5.猪的胎盘类型属上皮绒毛模型,没有母源抗体。

6.猪的心血管系统、消化系统、营养需要、骨骼发 育以及矿物质代谢等也与人颇为相似。 皮肤烧伤的研究 猪的皮肤与人非常相似,如体表毛发的疏密,表皮厚薄,表皮具有的脂肪层,表 皮形态和增生动力学, 烧伤皮肤的体液和代谢变化机制等,故猪是进行实验性烧 伤研究的理想动物。 肿瘤研究 免疫学研究 猪的母源抗体只能通过初乳传给仔猪。剖腹产仔猪,在几周内,体内γ球蛋白和 其他免疫球蛋白很少,无菌猪体内没有任何抗体,一旦接触抗原,能产生极好的 免疫反应。可利用这些特点进行免疫学研究。 心血管病研究 猪冠状动脉循环,在解剖学、血液动力学上与人类相似。对高胆固醇食物的反应 与人一样,很容易出现动脉粥样硬化的典型病灶。 营养学研究 仔猪和幼猪与新生婴儿的呼吸系统、泌尿系统、血液系统很相似。仔猪象婴儿一 样,也患营养不良症,蛋白质、铁、铜和维生素A的缺乏症。因此,仔猪可广泛 应用于儿科营养学研究。 遗传疾病研究 如先天性红眼病,卟啉病、先天性小眼病、先天性淋巴水肿等遗传性疾病。 牙科研究 沙鼠:在医学中的应用长爪沙鼠脑底动脉Willis环的变异 ---脑神经疾病研究寄生虫病研究---微生物学研究---生殖、内分泌研究--营养、代谢---药理学---肿瘤研究---其它研究 第8章 1、免疫缺陷动物(immunodeficientanimal) 免疫缺陷动物(immunodeficientanimal)是指由于先天性遗传突变或用人工方法 造成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。 一、裸小鼠 指先天性无胸腺无毛的裸体小鼠(Nude mice)。导致这种异常状态的裸基因(nu) 是一个位于11号染色体上隐性突变基因。纯合裸基因(nu/nu)小鼠具有典型缺 陷特征: 二、裸大鼠 裸大鼠(Nude rat),在1953年由英国Rowett首先发现,基因符号为rnu。纯合子 裸大鼠(rnu/rnu)具有与裸小鼠基本相似的特征,能接受人类正常组织和肿瘤 的异种移植,体型大可为常规血液学和血清生物化学分析实验提供足够的血样, 也可为各种研究提供足够的瘤组织。易于进行外科手术,为各部位保瘤移植和肿 瘤供血研究提供了方便。

三、性连锁免疫缺陷小鼠 (X-linked immune deficiency mouse XID)起源于CBA/N品系。B细胞功能缺 陷, 基因符号xid, 位于X性染色体上。 纯合子雌鼠 (xid/xid) 和杂合子雄鼠 (xid/Y) 对非胸腺依赖性Ⅱ型抗原没有体液免疫反应,是研究B淋巴细胞的发生、功能与 异质性理想动物。 四、Beige小鼠 为NK细胞活性缺陷的突变系小鼠,bg是隐性突变基因,位于第13号染色体上。 纯合的小鼠(bg/bg),表型特征与人的齐-希二氏综合征(Chediak-Higashi syndrome)相似。由于溶酶体功能缺陷,bg对各种病原因子较敏感。在SPF 环境中才能较好地生存。采用纯合子繁殖。 五、严重联合免疫缺陷小鼠 SCID小鼠(severecombinedimmunodeficientmice)在1983年由美国学者 Bosma首先发现于C.B-17近交系小鼠,是位于第16号染色体的称之为scid的单 个隐性突变基因所导致。SCID小鼠在高度洁净的SPF条件下存活1年左右.

2、转基因动物(Transgenic animals) 1982年,Richard Palmiter 和Ralph Brinster 领导的研究小组将大鼠的生长激素基 因,显微注射到小鼠胚胎中,从而培育出了世界上第一批转基因小鼠。 通过基因工程对DNA进行体外操作,添加或删除一个特殊的DNA序列,然后导 入早期的胚胎细胞, 所产生遗传结构得以修饰的动物,其改变的性状可以遗传给 后代。这些“New Animal”统称为转基因动物。

TgX(YYYYYY)#####Zzz, 其中各部分符号表示含意为: TgX=方式(mode) (YYYYYY)=插入片段标示(insertdesignation) #####=实验室指定序号(laboratory-assignednumber)及 Zzz=实验室注册代号(laboratorycode) 基因敲除动物 一、概述 是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除 (knock out),或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测 相应基因的功能。 1987年,Martin Evans,Oliver Smithies 和Mario Capecch 领导的几个研究小

组对胚胎干细胞中特定目标基因进行失活,培育出了第一只基因敲除小鼠。

3、克隆动物(cloning animal ) 动物通过体细胞进行的无性生殖 (也称无性繁殖)以及由无性生殖形成的基因型 几乎完全相同的后代个体组成的群体。 世界卫生组织在关于克隆的非正式声明中定义为: 遗传上同一的机体或细胞系(株)的无性生殖。 (一)胚胎分割 (二)细胞核移植: 1.胚胎细胞核移植 2.胚胎干细胞核移植 3.胎儿成纤维细胞核移植 4.体细胞核移植

4、常用的转基因动物技术方法有哪几种? 精子载体导入法、显微注射法、电脉冲法、逆转录病毒法、胚胎干细胞法 (二)反转录病毒感染法 将外源基因DNA插入逆转录病 毒载体;通过辅助细胞包装成病毒颗粒,感染胚胎;再将感染的桑椹期胚胎导入 子宫。 (三)胚胎干细胞法 (1)获取胚胎干细胞(ES细胞); (2)将外源基因导入ES细胞; (3)获取囊胚期胚胎; (4)将含有外源基因的ES细胞注入囊胚期胚胎的腔内; (5)将其移植到假孕动物子宫。 (四)电脉冲法 利用外界高电压短脉冲使细胞膜产生可逆性穿孔,外源性DNA通过此孔可进入 细胞。 (五)精子载体导入法 以精子作为外源性DNA的载体,通过受精作用将外源性DNA导入受精卵。

第9章
人类疾病动物模型(animal models of human diseases): 是指医学研究中建立的具 有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料。 第一节人类疾病动物模型的概念和分类 二、人类疾病动物模型的意义

(一)避免人体实验造成的危害 (二)提供发病率低、潜伏期长和病程长的疾病材料 (三)可增加方法学上的可比性 (四)样品易得,分析实验简化 (五)有助于更全面地认识疾病本质 三、人类疾病动物模型的复制原则 相似性,重复性,可靠性,适用性和可控性,易行性和经济性 四、人类疾病动物模型的分类(一)按产生原因分类 1.实验性动物模型(experimental animal model)又称诱发性动物模型,是指研究 者通过使用物理的、化学的、生物的和复合的致病因素作用于动物,造成动物组 织、器官或全身一定的损害,出现某些类似人类疾病时的功能、代谢或形态结构 方面的病变,即人为地诱发动物产生类似人类疾病模型。 2.自发性动物模型(spontaneous animal model)自发性动物模型是指实验动物未 经任何人工处置,在自然条件下动物自然发生,或由于基因突变的异常表现,通 过遗传育种保留下来的动物模型。 3.抗疾病型动物模型(negative animal model)抗疾病型动物模型是指特定的疾病 不会在某种动物身上发生, 从而可以用来探讨为何这种动物对该疾病有天然的抵 抗力。 4. 生物医学动物模型(biomedical animal model)生物医学动物模型是指利用健康 动物生物学特征来提供人类疾病相似表现的疾病模型。 5.遗传工程动物模型(transgenic animal model) 6.免疫缺陷动物模型(immunodeficientanimal

(二)按系统范围分类 1.疾病的基本病理过程动物模型(animal model of fundamentally pathologic processes of disease)疾病的基本病理过程动物模型是指各种疾病共同性的一些 病理变化过程模型。 2.各系统疾病动物模型(animal model of different system diseases)各系统疾病动 物模型是指与人类各系统疾病相应的动物模型,如消化、呼吸、泌尿、心血管、 神经等系统疾病相应的动物模型。 (三)按模型种类分类 疾病模型的种类包括整体动物、离体器官和组织、细胞株和数字模型。 (四)按中医药体系分类 根据中医证分类,动物模型可分为阴虚、阳虚动物模型、气虚动物模型、血虚动 物模型、脾虚和肾虚动物模型、厥脱证动物模型等。 按中药理论分类,有解表药、清热药、泻下药、祛风湿药、止血药、化痰药、补 益药、理气药等动物模型。 诱发性疾病动物模型(experimental animal models): 通过人为方式使实验动物受到物理、化学、生物等致病因素的作用,而发生类似 某种人类疾病的动物模型

一、运动系统疾病动物模型 (一) 骨质疏松 1.维A酸致骨质疏松雄性成年Wistar大鼠,灌服维A酸连续2周,停药2周后出现骨 质疏松。 2.糖皮质激素致骨质疏松3月龄雄性SD大鼠,用醋酸泼尼松灌胃,每周2次,连续3 个月。 (二) 股骨头坏死新西兰兔,每周2次肌肉注射醋酸强的松龙。使用激素3个月至 半年。 (三) 类风湿关节炎体重180g的Wistar大鼠右后肢足底皮下注射福(Freund’s) 完全佐剂。 造模后3d局部关节明显肿胀, 病变与人的类风湿关节炎相似。 Freund’s 完全佐剂的配制: 取灭活卡介苗200mg加入7mL液体石腊油中搅拌均匀,在46℃水 中再加入羊毛脂0.7mL,混合均匀后置4℃冰箱保存。 二、消化系统疾病动物模型 (一) 幽门螺杆菌感染致慢性胃炎 (二) 急性胃溃疡1. 应激法体重200~250g成年大鼠,禁食24h,将其四肢固定于木 板上,垂直浸入23±0.5℃水浴至剑突水平,24h后取出处死,经向胃内注入1% 福尔马林溶液8mL固定后,将胃取出固定,剖检。 2. 药物法吲哚美辛(消炎痛)法7周龄SD大鼠,禁食24h,自由饮水,喂饲料2-5g 后30min,用吲哚美辛作皮下注射或灌胃。投药后10h溃疡最严重,胃体部几乎不 产生溃疡,幽门部和小肠均产生溃疡。 (二) 慢性胃溃疡醋酸法体重210g的Wistar大鼠或SD大鼠, 禁食24h,乙醚麻醉后, 在胃体与幽门交界血管最少处,用微量注射器向浆膜下注入20%醋酸0.05ml。 关闭腹腔。一般可形成8-12mm的溃疡,并常常为穿透性溃疡,甚至穿孔。 (四) 溃疡性结肠炎醋酸法用300-350g雄性SD大鼠,禁食16h,经导管向结肠内灌注 8%醋酸2ml,20s后再注入5ml生理盐水冲洗,可造成结肠溃 1. 小鼠吸入2%SO2,10s/d,14-18d即出现支气管炎病变,27d后出现重型支气管 炎病变。此外,还可吸入氯气、氨气造模。 2. 大鼠 在27m3的烟室内,用混合烟(200g锯末,15-20g烟叶,6-7g辣椒及1g 硫磺混合,20-30min内烧化,颗粒在0.5-1μm以上)150-200mg/m3吸入,每 周6次,44d即可形成慢性支气管炎病变。也可用多种细菌混合液滴鼻造模。 1. 新西兰兔高血脂症模型在饲料中加入15%蛋黄粉、0.5%胆固醇和5%猪油,经3 周后,将饲料中的胆固醇减去,再喂3周,主动脉斑块发生率达100%,血清胆固醇 可升高至20g/L。体重2kg新西兰兔,喂服胆固醇0.3g/d,连续4个月后,肉眼 可见主动脉粥样硬化斑块; 若胆固醇量增至0.5g/d, 只需3个月; 若增至1.0g/d 只需2个月。 2. 犬和家兔模型麻醉后, 俯卧位固定。 从脊柱旁1.5-2cm处开始, 右侧顺肋骨缘, 左侧在离肋骨缘约两指宽的地方作4cm长皮肤切口,用手指通过手术区摸到 肾脏,在肾内侧缘与主动脉之间找到强力搏动的肾动脉。按所需长度小心钝 性分离出一段肾动脉,选用一定直径的银夹或银环(6-8kg犬所用银环直径

0.8-1.2mm,家兔所用银环直径0.5-0.8mm)套在肾动脉上造成肾动脉狭窄。 如果是单侧肾动脉狭窄,术后10-12d再将另一侧肾脏摘除。 大鼠模型 3. 选用SD大鼠,雌雄不拘,体重180-220g;测量并记录血压。腹腔注射2%-3% 戊巴比妥钠麻醉,沿腹正中线作1-2cm切口,用手指伸入腹腔触摸肾脏,在肾 切迹与主动脉之间找到强力搏动的肾动脉。按所需要长度用玻璃棒钝性分离 出一段肾动脉, 选用直径0.2-0.3mm的银夹或银环套在肾动脉上造成肾动脉狭 窄。如果是单侧肾动脉狭窄,12d后将另一侧肾脏摘除。 4. (三) 心肌梗塞1. 家兔模型雄性青紫兰兔, 体重2.5kg左右, 麻醉后仰卧固定于 手术台上,静卧10min,记录心电图。分离左颈总动脉测血压。沿胸骨中线切 开皮肤至剑突上,沿胸骨左缘剪开2~4肋软骨,用开胸器撑开胸腔,剪开心包 并将其缝于胸壁切口及周围组织,于左心耳下约0.5cm左右处用0号线结扎冠 状动脉左室支,造成左室侧、后壁急性心肌缺血损伤,关闭胸腔。动态观察 结扎后心电图及血压改变, 家兔心电图ST段明显升高, 部分出现病理性Q波, 少数出现心律失常。 犬模型 5. 戊巴比妥钠30mg/kg静脉麻醉下,气管插管给氧。仰卧位固定犬,从胸骨左 侧第四肋间开胸,于距离膈神经前约1cm处切开心包,边缘固定,充分暴露 心脏左侧壁,然后结扎左冠状动脉左旋支的钝缘支,包括与之相连的各侧支 和吻合支,及左冠状动脉前降支的第1-4分支。为避免结扎过程动物因心律失 常而死亡,可采用二步结扎法。即先在钝缘支的近端套两根4号线,在近端线 中先绑一个5号半针头,再进行结扎。10s内拔去针头使该区血管缩窄致针头 粗细的口径。过30min后,以远端线进行第二次结扎。随后分别结扎小侧支、 前降支各分支以及吻合支 七、内分泌系统疾病动物模型(一)糖尿病1. 化学物质诱发模型——链脲佐菌 素或四氧嘧啶模型。 (1)链脲佐菌素模型:腹腔注射法:体重200-280g的SD大鼠, 雌雄各半,禁食18~24h,按60mg/kg体重腹腔内注射链脲佐菌素(溶于0.1mol/L 柠檬酸缓冲液,pH4.4),几天后发生糖尿病。造模前、造模后1个月和3个月,于禁 食12h后采血检测血糖含量。静脉注射法:犬或大鼠,静脉注射30~100mg/kg 体重剂量的链脲佐菌素,几天后产生糖尿病。 (2)四氧嘧啶模型:按30-150mg/kg剂量给大鼠或犬一次静脉或腹腔注射四氧嘧 啶,数天后出现糖尿病。注射链尿佐菌素后血糖出现3个时相变化:早期 (1~4h)——短暂高血糖(应用链尿佐菌素者延迟45~60min才出现高血糖);中期(持 续48h)——出现低血糖, 可导致实验动物死亡; 后期(48h后)——形成长期高血糖。 实验动物表现多食、多尿、消瘦、高血糖、尿糖、高血脂、酮尿及酸中毒。 八、感觉器疾病动物模型(一)角膜炎(二)白内障5~6周龄、体重50~60g的大鼠,雌 雄不拘, 喂饲含50%半乳糖的全价营养标准饲料。 4d后大鼠晶状体发生病理改变, 14~19d出现白内障。但停喂半乳糖30d后,白内障开始恢复,45~60d白内障将完 全消失。 (三) 中耳炎选用家兔,以注射器穿破鼓膜,并向鼓室注入10~20%阿拉伯树胶松 节油乳剂0.25ml。10-20h后发生急性中耳炎。或选用豚鼠,以玻璃微管刺穿其鼓 膜,并将流感嗜血杆菌B菌液经玻璃微管注入鼓室。可诱发急性细菌性中耳炎。 九、 神经系统疾病动物模型(一) 脑缺血动物大脑中动脉阻断可引起局灶性脑缺血, 而出现中风症状。选用体重250-300g的成年SD大鼠,雌雄均可,麻醉后右侧卧位

固定, 开颅暴露大脑中动脉, 用电压为12V的双电极电灼损毁Willis动脉环(大脑动 脉环)起始至嗅沟段的大脑中动脉,使其阻塞,血流中断。 正常大鼠在提尾垂吊时双前肢能伸直触地。造模大鼠在提尾垂吊时,可有不同程 度的右前肢向对侧偏斜或屈曲回缩,不能伸向地面;平衡功能亦发生障碍,行走 时向右侧旋转。 (三) 脑出血向动物尾状核注入自体血,可造成脑出血模型。大鼠麻醉后,俯 卧固定于脑立体定位仪,并做股动脉插管,从颅骨表面垂直穿刺抵达尾状核 区域,把从股动脉抽取的血液50~60μ l注入尾状核。骨腊封闭颅骨孔。脑出 血后的实验大鼠在提尾垂吊时,出现出血灶对侧肢体瘫痪,其表现与脑缺血 的症状体征相似。 (四) (三) 脑出血血肿清除术模型 (五) 先制作大鼠双侧肾动脉狭窄性高血压模型(参见肾阴虚型高血压动物模 型有关内容)。其后60d,将50μL的微气囊置于25号针内,定向刺入大鼠尾 状核中心,在平均动脉压条件下充胀微气囊,造成脑出血占位性效应,24h 后将微气囊放气,模拟血肿清除术。 (六) (四) 脑水肿 (七) 动物注射伤寒内毒素可导致脑水肿。 选用体重1.4-3kg的家兔, 雌雄均可。 十、老年病动物模型(一) 衰老模型1. 自然衰老:大鼠衰老早期在21~26月龄,衰 老晚期为30~32月龄。小鼠进入12~24月龄属老年期。2. D-半乳糖致亚急性衰老: 选小鼠, 每天注射D-半乳糖一次, 连续30~60d。 可诱发亚急性糖代谢衰老。 (注: 也可选大鼠,皮下注射D-半乳糖连续42天,可诱发亚急性糖代谢衰老) (二) 老年性痴呆1. 一侧海马伞切断致老年性痴呆取24个月龄以上,体重 700~800g的老年雄性Wistar大鼠,或24月龄以上的老年雌性SD大鼠。可直接复制 老年性痴呆模型,或先制作衰老模型,进而复制老年性痴呆模型,在不足24月龄 大鼠往往采用后一种方法。 先颈部皮下注射D-半乳糖连续42d,采血测定SOD活性,若SOD活性明显下降, 表明复制亚急性衰老模型成功。然后麻醉俯卧位固定于脑立体定位仪上,开颅, 将左侧大脑半球的皮质连同髓质一并切除,露出深部的尾壳核、隔区、海马、海 马伞等,用脑立体定位仪确定左测海马伞位置,将其切断。

十一、血液系统疾病动物模型白血病用津638病毒诱发的昆明种小鼠白血病组织 的无细胞提取液,给新生615小鼠皮下注射,经过81d潜伏期,取1只患白血病小 鼠的脾脏,用生理盐水制成25%的脾细胞悬液,皮下注射到成年615小鼠体内, 均发生白血病,为T淋巴细胞白血病。 已明确本病是由人类胸腺白血病病毒Ⅲ(HTLVⅢ)逆转录病毒所引起,病毒进入 体内易感染T淋巴细胞,得病后易患条件致病菌感染而死亡。 用D型逆转录病毒SRV-1或SRV-2人工感染猴,可诱发猴SAIDS。用猴免疫缺陷病毒

(simianimmunodeficiencyvirus, SIV) 人工感染恒河猴, 亦能迅速发生SAIDS。 (二)系统性红班狼疮诱发性系统性红斑狼疮模型将C57BL/10小鼠与CBA/2小鼠 杂交所生F1代小鼠,在无菌操作下取亲代CBA/2小鼠的脾、胸腺、淋巴结,在尼 龙薄膜上轻轻挤压,制备含单个脾细胞、胸腺细胞、淋巴结细胞悬液。将上述悬 液按脾细胞(或胸腺细胞)∶淋巴结细胞= 2∶1的比例混合,并以每鼠1.0×107 个淋巴细胞剂量给F1代小鼠作静脉注射, 第7天重复注射1次, 同时注射50IU肝素。 第3周可形成自身抗体,第4周出现系统性红斑狼疮病变。

十三、传染病寄生虫疾病动物模型1.人疟动物模型将人疟原虫(恶性疟、间日疟) 通过含一定量红细胞内期疟原虫的血液静脉注射给易感的猴。 用带有子孢子的按 蚊叮咬易感猴,均可制作出人疟感染模型。2.猴疟动物模型用食蟹猴疟原虫感染 斯氏按蚊或大劣按蚊,再由按蚊感染恒河猴。3.鼠疟动物模型将伯氏疟原虫接种 到昆明种等小鼠血液中,并用感染小鼠血液接种传代。但每过3~5代必须经斯氏 按蚊传代1次才能保持疟原虫的活力。

第三节自发性疾病动物模型自发性疾病动物模型(Spontaneous Animal Mode1s)——主要是由突变系动物经定向培育而稳定遗传的实验动物。突变系动 物(mutant strain animal)——由自然变异或人工致畸,使正常染色体上的基因 发生突变, 而具有某种遗传缺陷或某种遗传特点的动物, 如裸鼠、 糖尿病大鼠等。

突变类型: 1、可见突变 2、生化突变 3、致死性突变 4、条件致死性突变

二、免疫缺陷动物模型 (一) 兔疫缺陷动物分类 1. T淋巴细胞功能缺陷动物:裸小鼠、裸大鼠、裸豚鼠、裸牛等。 2. B淋巴细胞功能缺陷动物:CBA/N小鼠、免疫球蛋白异常血症动物。 3.NK细胞(杀伤细胞)功能缺陷动物: Beige小鼠等。4.联合免疫缺陷动物: SCID小鼠、Motheaten小鼠等。 6. 获得性免疫缺陷动物模型:小鼠AIDS模型、猴SAIDS模型、家兔恶性纤维瘤综 合征模型等 (二) T淋巴细胞功能缺陷的动物模型裸小鼠和裸大鼠, 见第六章内容 (三) B淋巴细胞功能异常的动物模型1、CBA/N小鼠,又称性连锁免疫缺陷小鼠

(X-linked immune deficiency mouse,XID) (四) NK细胞功能缺陷的动物模型1、Beige小鼠 (五) 联合免疫缺陷的动物模型SCID(严重联合免疫缺陷)小鼠(severecombined immune deficency,SCID)

三、内分泌及其它自发性疾病动物模型(一) 糖尿病1. 小鼠KK糖尿病小鼠(非胰 岛素依赖型) 2.大鼠 (1) BB Wistar大鼠 (胰岛素依赖型) (2 ) 肥胖性糖尿病Wistar 大鼠(obese Wistar fatty rats) (非胰岛素依赖型)3. 地鼠(非胰岛素依赖型)

第10章:
整体实验:LD50、活存时间、活存率离体实验:器官灌注、组织切片、细胞培养急 性实验:急毒,1~2天亚急性实验:药效,1~4周慢性或长期实验:长毒、“三 致”、转基因动物,>3~6个月

在论文中如何描述动物实验?
(一)标题中实验动物种名的记述 (二)实验动物的品种(系) (三)实验动物的来源、遗传背景及微生物学质量 (四)动物性别 (五)动物年龄、体重 (六)动物饲养方式 (七)实验环境 (八)实验动物和动物实验条件合格证 (九)使用的麻醉剂 (十)施加实验因素所采用的方式

(十一)处死方法 ?何谓安死术?常用的安死术有哪些方法?

安乐死(时间短、 痛苦少)动物安死术( Animal euthanasia)是指动物在无疼痛下死 亡的手段,是以人道的方法处死动物的过程。但严格来说,安乐死除了不造成动 物疼痛之外,也应该快速而且不使动物在整个过程当中感到恐惧。 ?常用的编号标记方法有哪些?染色法的原则是什么? 化学药物:二氧化碳,三氯甲烷乙醚,氯化钾, 乙醇脱臼断髓:颈椎脱臼 空气栓塞:兔40ml,狗100ml 急性失血:大动物麻醉股动脉放血 编号标记 目的:为了分组 要求:清晰、耐久、简便、适用

颜料标记颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有 5%苦味酸溶液(黄色) 2%硝酸银溶液(咖啡色) 0.5%中性品红溶液(红色) 煤焦油的酒精溶液(黑色)。 编号原则:先左后右,从上而下。 烙印、纹身、号牌、毛色、剪毛、打孔 全身麻醉1%硫喷妥钠:15mg/kg,iv/ip 2%戊巴比妥:40mg/kg,iv/ip 盐酸氯胺酮:40mg/kg,sc/im 复方氯胺酮:0.01ml/kg,sc/im 局部麻醉 1%盐酸普鲁卡因,局部注射 2%盐酸可卡因,粘膜表面麻醉 急救 原因:麻醉过量、大失血、窒息 措施:人工呼吸 强心剂:0.1%肾上腺素 呼吸兴奋剂:尼可杀米 山梗菜碱

快速输血、输液

动物的抓取与固定方法
目的:限制动物的活动,持安静状态 以便正确操作和记录 要求:不损伤实验动物 不影响观察指标 实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行 小心细致、大胆敏捷,切忌粗暴。 动物灌胃、皮内注射、皮下注射、肌肉注射、腹腔注射、静脉注射 小鼠0.9 0.1 1.5 0.2 1.0 0.8 大鼠5.0 0.1 5.0 0.5 2.0 4.0 兔200 0.2 10 2.0 5.0 10 猫150 0.2 10 2.0 5.0 10 猴300 0.3 50 3.0 10 20 狗500 0.3 100 4.0 __ 100 剪毛法 拔毛法 剃毛法 脱毛法:脱毛剂 1) 8%NaSNaS 2) 10%NaS硫化钠3) 硫化硷

肝素:1ml血液内加入20国际单位肝素(1mg等于120单位, 市售肝素钠注射液12500 单位/2ml约为50mg /ml)即可达到抗凝目的,可将肝素配制成500单位/ml置4℃保 存, 或于试管内加入100单位肝素液后于80℃烤干备用, 后者可抗凝3~5ml血液。 草酸盐合剂(草酸胺1.2g,草酸钾0.8g,甲醛1.0ml) 0.1ml、5%枸橼酸钠液0.1ml、 2%草酸钾溶液0.1ml均可使1ml血液抗凝。2.7%EDTA0.5ml可使10ml血液抗凝。

?动物实验后废弃物应如何处理?
动物实验后废弃物的无害化处理 一、组织管理 在各单位实验动物管理委员会的指导下,所属的动物实验中心(或室)对废物的 无害化实行专人领导和专人负责制, 并制定相应的规章制度强化动物实验中的废 弃物的无害化处理的管理。 二、污水的无害化处理

动物实验中的污水来自动物的尿粪液、笼器具洗刷、废弃的消毒液、实验中的废 弃的试液等,并且使用量大。 实验室排出的污水应首先集中在贮水池中进行消毒。 如果是做动物感染实验所产生的污水, 必须先彻底灭菌后方可排入污水储水池进 行消毒。 三、污物的无害化处理 (一)在动物中心领导下,实行专人管理和处理 (二)分类收集 1.污物应分类收集,实验动物废垫料与实验废弃品要分开,不得混放。 2.实验后收集的污物不得直接向垃圾道内倾倒,污物要用污物处理容器,进行 盛装。然后汇总于专用污物袋中进行一次性封闭处理。 3.有机垃圾盛装器应密封有盖,防渗漏、防蝇、防鼠、并便于搬运及消毒。 (三)无害化处理 1.一次性口罩、帽子等使用后应装入专用垃圾袋回收焚烧处理。 2.一次性使用的注射器、针头、手套等物品使用后经消毒剂浸泡清洗,毁形后 按要求统一进行无害化处理。绝不可自行处理和随意扔掉。 3.用过的废垫料要装入垃圾袋中或专用的垫料容器内,注意防蝇、防渗漏,并 及时焚烧处理。 4.进行放射性实验所产生的废弃物,如果属于短半衰期且放射性较低的物品, 放置6-10个半衰期后可以焚化处理。其他放射性废弃物,应进行中、长期安全包 装后送放射性废物处理站处理。 四、废弃动物及动物尸体无害化处理 实验结束后,受试动物尚未死亡,应采用安死术处理,并将动物尸体装入专用尸 体袋中存放冰柜待统一焚烧。 如实验过程中怀疑受试动物是因其它疾病死亡,应 及时查明原因。动物尸体经消毒处理后装入尸体袋中,冷冻待焚烧处理。较大受 试动物尸体需经过适当肢解后再进行焚烧。 焚烧效果应以污物全部化为灰烬为标 准。

第11章 在科研实验中如何选择实验动物??
一、选择的基本原则? (一)选择与人的功能、代谢、结构和疾病特点相似的实验动物 (二)选择遗传背景明确、体内微生物得到控制或模型症状显著的动物 (三)选用解剖、生理特点符合实验目的要求的动物? (四)选择对实验因素最敏感的动物 (五)选择与实验目的相适应的动物? (六)选择要符合3R原则

(七)选择要注意动物福利?

科研论文是由几部分构成的?
论文分为前置﹑主体﹑附录三部分。 前置包括:文题﹑作者﹑中英文摘要及关键词。 主体包括: 前言﹑正文﹑致谢和参考文献,其中正文有材料与方法﹑结果﹑讨论 ﹑结论等主要内容。 附录包括: 作者单位﹑地址﹑邮编﹑作者简介﹑课题基金等级和项目及其它特殊 说明。

二、常见医学实验中实验动物的选择 (一)药物毒性实验的动物选择 做毒性试验时, 选择何种实验动物取决于该动物对药物的反应以及药物在该种动 物体内的吸收、分布、代谢和排泄与人类异同的程度。 如犬在毒理方面的反应和人比较接近;大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感。 在研究药物对心脏作用时, 可选择青蛙和蟾蜍。对神经传导阻滞影响的药物研究 时首选动物是猫。研究药物对神经肌肉接点的影响时,常用猫、兔、鸡、小鼠和 蛙。对影响副交感神经效应器接点的药物进行研究时,首选大鼠。研究药物对平 滑肌的作用,要选犬和猫。 注意以下几点:(1) 动物的进化程度越高,对药物毒性的敏感性越好。如兔和猫 的中毒致死量比小鼠低数倍, 犬和猴的中毒剂量又比兔和猫低,而人往往更为敏 感。(2)选用未成年的实验动物较为合适。慢性毒性试验开始选择的小鼠年龄最 好是2~3周,而大鼠不超过3周。当然,避孕药物的毒性试验要求使用性成熟动 物,如小鼠应是60日龄以上,大鼠应在120日龄以上。(3)选择做毒性试验时,动 物应雌雄各半。(4)实验要求至少采用两种不同种属的动物:

(二)消化、呼吸系统实验的动物选择 不能选择兔、羊、豚鼠等草食动物作为研究消化系统疾病的模型。犬有发达的 消化系统和与人类极为相似的消化器官,可做消化系统的慢性实验。对胰腺炎的 研究,可选择年轻雌性小鼠造成胆碱缺乏诱发出血性胰腺炎。猫、犬等中年以上 肥胖动物常会自发慢性胰腺炎,由于犬的胰腺很小,适合做胰腺摘除手术。 幼猪的呼吸、泌尿及血液学系统与人的新生儿相似,适于研究营养不良症。大 鼠的肝脏再生能力强,适于做肝切除术。甲型肝炎病毒的研究,可选择红面猴, 因该病毒可在红面猴中增殖。猴的气管粘膜腺体数量较多,做慢性支气管炎研究 和祛痰平喘药物疗效实验研究很合适。 2、生殖生理实验 雌激素能终止大鼠和小鼠妊娠,却不能终止人早期妊娠,作终止妊娠动物试验

观察时,就不要选择大鼠和小鼠。兔是刺激性排卵的动物,可进行生殖生理和避 孕药的研究。猴的月经周期为28 d,生殖生理与人非常接近,是人类避孕药物研 究极为理想的实验动物。 1、微循环实验 犬适合做的血液循环系统的实验研究,如失血性休克、实验性弥散性血管内凝血 等。猴、猪有与人相似的循环系统,血压稳定,对药物有一致的灵敏反应,便于 手术操作和适于分析药物对循环系统的作用机制。猫有较强的心搏力,能描绘完 好的血压曲线, 更适合药物对循环系统作用机制分析。外周微循环实验观察常选 用小鼠耳郭、金黄地鼠颊囊、兔眼球结膜。内脏微循环实验观察,常选用青蛙、 大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猫和犬的肠系膜、大网膜和肠壁; 2、心血管疾病实验 (1)动脉粥样硬化症鸽具有与人类相似的自发性粥样硬化症,且在短期喂饲 胆固醇后, 可在主动脉的可预测区域发生病变,可用来研究与病变发生有关的早 期代谢变化。 小型猪可自发产生动脉粥样硬化,也可用高脂饲料诱发并加速动脉 粥样硬化的形成。 其病变特点及分布情况都与人类相似,是研究动脉粥样硬化的 理想实验动物 (2)高血压常选用的动物是犬和大鼠。通常选择以刺激中枢神经系统反射性引 起实验性高血压, 或注射加压物质以及分次手术结扎肾动脉来诱发肾源性高血压。 已培育的高血压大鼠:如遗传性高血压大鼠(GH)、自发性高血压大鼠(SHR)、 易卒中自发性高血压大鼠(SHRSP)、自发性血栓形成大鼠(STR)等

(五)神经系统实验的动物选择 研究脑梗死所呈现的卒中、 术后脑缺血以及脑血流量时, 沙鼠是较好的实验物。 结扎沙鼠的一侧颈总动脉, 数小时后, 就有20%~65%的沙鼠出现脑梗死。 另外, 沙鼠还具有类似人类自发性癫痫发作的特点。DBA/2N小鼠在35日龄时,听源性 癫痫发生率为100%,是研究癫痫的良好模型。 (六)其他实验的动物选择 1、放射实验 不同动物对射线敏感程度差异较大,常选用大鼠、小鼠、沙鼠、犬、猪、猴等实 验动物进行研究。故不能选用兔进行放射医学的研究。 2、微生物实验 常选用小鼠、大鼠、沙鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、猴、猫、裸鼠进行微生物实 验研究。裸鼠很容易感染细菌、病毒和寄生虫,因此是研究这些感染免疫机制的 理想动物模型。 三、动物样本的确立及分组 (一)影响实验动物样本数量的因素 1. 实验动物对受试品敏感度的高低。

2. 3. 4. 5. 6. 7.

拟采取的措施(如药物或手术)有效率的高低。 要求试验精度的高低。 要求实验把握度(1-β)的大小。 要求实验组与对照组差异显著性的程度。 实验动物个体差异大小。 实验动物分组的多少。 8. 拟采用双侧还是单侧检验。

(二)实验动物样本数量的确立 (1)国内、外有关文献报道资料 (2)自己所在科学研究小组的实践经验 (3)预试验的结果 第二节动物实验设计基本方法 一、动物实验设计的基本要素 处理因素、实验动物的选择和实验效应。 指标观察时应注意: (1)研究者的心理往往偏于阳性结果。 (2)应注意处理与效应的关系 如剂量反应曲线。 二、动物实验设计的基本原则 对照原则、随机原则和重复原则等。 三、常用的动物实验设计方案 (一)完全随机设计 (二)配对设计 (三)配伍组设计 (四)自身比较设计 (五)交叉设计 (六)拉丁方设计


更多搜索:实验课考试内容

推荐相关:
网站首页 | 网站地图
All rights reserved Powered by 大学生考试网 9299.net
文档资料库内容来自网络,如有侵犯请联系客服。zhit325@qq.com