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硕士论文--咖啡酰奎尼酸衍生物的设计、合成及生物活性研究

硕士论文--咖啡酰奎尼酸衍生物的设计、合成及生物活性研究


浙江大学药学院 硕士学位论文 咖啡酰奎尼酸衍生物的设计、合成及生物活性研究 姓名:张丽娟 申请学位级别:硕士 专业:药物化学 指导教师:赵昱;李校堃 20080601





天然产物的开发利用在药物发展史上一直占据着非常重要的地位。近几十 年,随着单晶衍射和核磁共振等技术的发展,药物分子设计和组合化学在药物 研究和开发中的地位日益提高。但实践证明,这些方法的应用并未使新药开发 的成功率提高,而在临床应用的一些新药中天然产物仍占大部分的比例。天然 化合物所具有的独特结构特征,仅通过化学合成是不可能获得的。咖啡酰奎尼 酸是一类自然界中分布十分广泛的天然产物,本论文即是围绕咖啡酰奎尼酸类
天然产物的结构改造而展开。

咖啡酰奎尼酸是一类活性广泛的天然产物,目前研究主要集中在植物化学 分离和药理活性方面。我们选取咖啡酰奎尼酸为母体化合物,对其进行结构改 造,并对咖啡酰奎尼酸类衍生物的合成进行了初步研究,设计并合成了5个系 列包括中间体在内的化合物58个,其中50个为新化合物。关于该类化合物的 合成及分离尚需进一步的摸索和改进。 关键字:天然产物;咖啡酰奎尼酸;设计;合成;生物活性。

Abstract important
role in drug

Natural

products(NP)have

traditionally played

an

discovery and were the basis of early medicines.Over the last 1 5 to 20 years advances in X-ray crystallography
as

and

NMR,and

alternative drug discovery

methods such

rational drug design and combinatorial chemistry have placed great

press upon NP drug discovery programmes.However,despite the promise of these

altemative drug discovery methods,there is still
progressing into clinical trials.This is especially the natural products have still played




shortage of lead compounds in therapeutic
areas

case

where

central role in lead discovery.It is impossible to
as

provide the diversity of compounds Caffeoylquinic acids
are

natural products only by organic syntheses.

widespread types of natural products occurring in nature.In
on

this thesis,the research was carried out acids. Caffeoylquinic acids activities.The hot
are

the derivitives of natural caffeoylquinic

kinds of natural pionts
are

products with focused
on

many

biological and

research

still


their

isolation

pharmacological activities.It has served as

lead compound for the synthesis of

derivatives to optimize their activity.Five series of target derivatives were and altogether 58 intermediate the moleculars
are

designed

and

target moleculars were synthesized,50 of all of

new compounds,they have not been reported to this day.The

synthetic method improvement.

and

isolation of this sort

of compounds are still need further

Key words:Natural Products;Caffeoylquinic acids;Biological activities;Design;

Synthesis.

IV

缩略语
MTT
DPPH CoX 12一LOX HBV

3-(4,5一dimethylthiazol?2一y1)一2,5一diphenyltetrazolium bromide
2,2-Diphenyl一1一picrylhydrazyl cyclooxygenase 1 2一lipoxygenase hepatitis B virus

HⅣ AmS
FMLP

human immunodeficiency virus
acquired immune deficiency syndrome

N-?formyl?-methionyl?-leucyl??phenylalanine

细胞株的名称列表
BGC Hela K562 A549 HL.60 LSl74T Eca PCI2 PC一3 1CNE H08910

人胃癌细胞

人宫颈癌细胞 人慢性粒细胞白血病细胞
人肺癌细胞

人早幼粒白血病细胞
结肠癌细胞 食管癌细胞

肾上腺嗜铬细胞瘤 人前列腺癌细胞 人鼻咽癌细胞 人卵巢癌细胞

Vl

浙江大学研究生学位论文独创性声明
本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成
果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表

或撰写过的研究成果,也不包含为获得堂鎏盘堂或其他教育机构的学位或证书而使
用过的材料。与我_同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说
明并表示谢意。

学位论文作者签名:拈丽嘁

签字日期.

M年多月陟日

学位论文版权使用授权书
本学位论文作者完全了解迸’江盘堂有关保留、使用学位论文的规定,有权保
留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授

权堑姿盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库迸行检索,可以采用
影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。
(保密的学位论文在解密后适用本授权书)

学位论文作者虢穆丽嘁
签字日期:刀叼8年多月/夕日

导师签名:赵昱

签字日期:力加纷多月/歹日

致谢
时光荏苒,在浙江大学药学院中药与天然药物研究室攻读硕士学位的学习生

涯即将结束。回想起这三年多学习生活的点点滴滴,使我想起一句诗词:“问渠 哪得清如许,唯有源头活水来”,不禁心涌感激之情。 在赵昱教授领导的研究团体里的经历和见识将是我一生的宝贵财富。这里有 先进的学术思想,我了解了在药物研究方面最新进展及动向;这里有先进的仪器 设备,我积累了对这些仪器设备的操作经验;这里有团结友爱、奋斗不息的团队, 在团队里的每一天我都得到了队友们的支持和鼓励。 我的导师,赵昱教授,在这短短几年时间里对我进行了精心的指导和耐心的 栽培。在专业知识和技能方面,恩师赵昱教授悉心传授。每一次seminar上,赵 老师都会亲自组织我们对学科方向上的最新进展进行学习,传授给我们他做实验 时的经验和独门绝技。赵老师非常注意培养我们细致入微,严谨求实的科研作风。 严谨,是做学问的人的安身立命之本,而在这方面赵老师永远是我们学习的榜样。 写文章时赵老师从一个标点符号到整体框架的构建都不厌其烦地帮我一遍又一 遍地修改,切切实实地让我体会到了赵老师严谨的治学态度和对学生的关心。每 次的工作汇报,赵老师仔仔细细地帮我分析实验中遇到的问题,规划好下一阶段 的工作,使我少走了很多弯路。赵老师严谨的风格、开阔的思维、对工作的敬业 精神时时刻刻激励着我在学习和实验工作上能够取得更大的进步。总而言之,我 在攻读博士学位期间获得的每一份成绩中都凝结着赵老师的心血。在这里,我向
我的恩师赵昱教授道一声:感谢师恩!

感谢导师李校垄教授在研究方向、科研方法及发展思路上的指导和支持。 感谢研究室巫秀美博士对我工作上的支持、以及文章修改和日常事务上的帮 助。同时感谢研究室工作人员吕旦旦小姐给予的帮助。 感谢药学院李连达院士、曾苏教授、胡永洲教授、楼宜嘉教授、程翼宇教授、 陈枢青教授、俞永平教授的关心。 非常感谢德育导师张小玲副书记对我工作上的指导和生活上的关心照顾。 感谢刘伟老师、黄佩芳老师、王立明老师、朱卡琳老师、黄欣欣老师的热心
帮助。

感谢杨雷香博士、王晓雨博士、施树云博士、宋丽艳博士、孙莲莉博士、董

南博士、王彩芳博士、陶巧凤博士、丁红霞博士、汪峰硕士、董盛谊硕士、敖雷 硕士、卢启洪硕士、郑威硕士、任胜芳硕士、冯玉冰硕士、翁林佳硕士、吴迪瑶
硕士、来弈刚硕士、马娜硕士、马伟丽硕士、胡明辉硕士、吴昊硕士、张相宜硕

士、肖昌钱硕士、何正春硕士、周良彬硕士在学习和生活上的关照。 特别值得一提的是,感谢我的家人这些年对我的教导和鼓励,他们伟大的关 爱一直陪伴着我走过这段艰辛而又美好的日子。
张丽娟 2008年5月 于浙江大学紫金港校区

第一章

咖啡酰奎尼酸类天然产物的研究进展

天然产物的研究和开发历来都是人类寻找新药以及向重大疾病作斗争的重 要手段之一。实践证明,从天然产物中发现活性先导化合物进而研发创新药物是 行之有效的一条重要途径。天然产物所特有的化学结构和生物活性的多样性,提 高了在天然产物中发现活性先导物进而研发创新药物的成功几率。天然药物甚至 在全球范围有着越来越重要的地位:世界天然药物市场主要分布在西欧、亚洲及 美国。据统计,1982.2002年间全球上市的looo多种小分子药品中,55%系来自 天然产物或其衍生物,其中6%直接为天然产物。2002年有报道称世界畅销的25 种药品中,12种为天然产物或其衍生物。我国50年来研究成功的新药90%以上系 与天然产物有关【l】。由此可见,天然产物与创新药物的关系密不可分,从天然产 物研发创新药物蕴藏着巨大潜能。 众所周知,中国地大物博,有着极其丰富的天然药物资源,其中药用植物种 类达一万多种,且科属品种繁多,分布在全国各种不同的地理环境中,富含生物 多样性和化学结构多样性,目前绝大多数尚未进行深入研究,这些资源为研发创 新药物提供了丰富的物质基础。随着人们对天然产物研究的逐渐深入,天然产物 的开发和利用再次成为新药研发的利器,我们必须利用我国所特有的丰富资源, 抓住契机,为人类寻找新药开辟更广阔的思路和途径。

1.1咖啡酰奎尼酸类天然产物的研究进展
奎尼酸((1R,3R,4R,5R)一1,3,4,5一Tetrahydroxycyclohexane-l—carboxylic acid,D一
(.)-quinic acid,金鸡纳酸)以游离态或以与咖啡酸(Caffeic acid)、阿魏酸(Ferulic

acid)、没食子酸(Gallic acid)等形成的不同酯的形式广泛存在于自然界中,即广 义的绿原酸(CGAs)。尽管奎尼酸在莽草酸途径中不是重要的中间体,但其存 在与该途径的调控有着重要关系;进而,相当数量不同种类的奎尼酸在天然产 物中的广泛存在还表明它在莽草酸途径中有其它代谢活性或与此途径中的其它 过程亦有相关,如:奎尼酸盐的3.位磷酸化【2】.1932年,H.O.L.Fisher和D. Dangschat鉴定了奎尼酸的结构及其立体化学特征【31。不久,他们又根据结构相 关性推测奎尼酸、莽草酸、及没食子酸应该有生物同源的可能性。这个假设在 20年后,"-3莽草酸途径被完全阐明后得到证实。

第一章咖啡酰李尼酸类天然产物的研究进展

奎尼酸可通过简单的途径以高纯的对映异构体形式从植物中分离得到,因 此奎尼酸可以购买得到,丰富的手性资源使其成为具有很大吸引力的合成不对 称的、复杂的天然产物衍生物的起始物141。 咖啡酰奎尼酸(Caffeoylquinic acids,CQA)是一类由奎尼酸与数日不等的咖啡 酸通过酯化反应缩合而成的酚酸类天然成分‘51。这类化合物广泛存在于植物界如 金银花、.旋覆花、苍耳等中药;山楂、苹果、李子等水果及咖啡、茶叶等饮品中。 其中在很多中药(茵陈、苎麻、金银花等)中广泛存在的绿原酸(Chlorogenic
acid)

就是抗菌、利胆的有效成分。从菜蓟(Cynara scolymus)中分离得到的菜蓟素 (Cynarin)也是一种保肝利胆成分。由于该类化合物在自然界中广泛的分布和独特 的化学结构及显著的生物活性,引起了科学家们广泛的研究兴趣,近20年来,国 内外学者就CQAff-'J植物化学和药理活性进行了广泛深入研究,发现其具有一些重 要生物活性,极具临床实用价值。 1.1.1一取代咖啡酰奎尼酸类化合物
狭义的绿原酸(Chlorogenic acid)是指由咖啡酸与奎尼酸组成的一取代的缩酚

酸,异名咖啡鞣酸,化学名5一D-咖啡酰奎尼酸(5.O.Caffeoylquinic acid),是植物 体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯丙素类化合物,是众多药材(如 金银花、茵陈、杜仲)以及中成药(如复肝尼、双花注射液、粉刺口服液)抗菌解毒、 消炎利胆的主要有效成分。同时也是某些中药制剂质量控制的重要指标。 1947年,Rudkin和Nelson两位科学家首次确定了绿原酸的化学结构,并命 名为3-0.咖啡酰奎尼酸(3.O.caffeoylquinic acid)【61。1950年,Barnes报道从咖啡 中分离得到了绿原酸的异构体,即5.O-咖啡酰奎尼酸(5.O-caffeoylquinic acid)171。 Dranik等人于1966年报道了朝鲜蓟(洋蓟)中4.O.咖啡酰奎尼酸(4一O.caffeoylquinic acid)的存在【81。1976年,根据IUPAC统一命名规则19],将绿原酸的命名更正为5.O一 咖啡酰奎尼酸(5.O-caffeoylquinic acid),但是由于多年来人们使用的习惯,直到 现在很多文献中依然保持着原来的命名方式。这势必造成一定的混乱,不利于科 研的进一步发展。本节所有命名都将依据IUPAC的统一命名规则。 绿原酸广泛存在于高等双子叶植物和蕨类植物中,主要存在于忍冬科忍冬属 (Lonicera)、菊科蒿属(Artemisia)植物中,其中含量较高的植物主要为杜仲、金银 花、向日葵、继木、咖啡、可可树等。另外,水果(如苹果、梨)、蔬菜(如马铃薯、


第一章咖啡酰夸尼酸类天然产物的研究进展

番薯)、大豆、小麦、绿茶等日常食用品中都含有绿原酸类物质.人们每天消耗 的植物性食品和饮品较多,可以吸收高达l909绿原酸【10】。 绿原酸的异构体在自然界中也广泛存在,一般而言,绿原酸主要存在于咖啡、 苹果、朝鲜蓟、茄子、桃子等食物中,而新绿原酸(3.O-caffeoylquinic acid)I)I,0主 要存在于樱桃、李子、接骨木、杏子等食物中,隐绿原酸(4—0.caffeoylquinic 在水果及蔬菜中的含量就相对很少了。


acid)

绿原酸是植物中的葡萄糖经过一系列的酶促反应生物合成的。葡萄糖在酶的 催化下转化成莽草酸,后者再转化成苯丙氨酸,最后经合成酶的作用得到绿原酸。 绿原酸具有广泛的生物活性,现代科学对绿原酸生物活性的研究已深入到食 品、保健、医药和日用化工等多个领域。绿原酸是一种重要的生物活性物质,具 有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由 基和兴奋中枢神经系统等作用。 绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂,其抗氧化能力要强于咖啡酸、对羟苯酸、 阿魏酸、丁香酸、丁基羟基茵香醚(BHA)和生育酚。咖啡酸、绿原酸、3,5一二咖 啡酰奎尼酸等酚酸都对DPPH自由基显示清除活性。可能的抗氧化机制为:儿茶 酚类(catechols)部分作为过氧自由基接受氢原子的供体,继而转化成低活性产物。 因此,它们可终止链自由基反应。绿原酸中含有一定量的酚羟基,能消除羟基自 由基和超氧阴离子等自由基的活性,从而保护组织免受氧化作用的损害。 Berinholt等人已经证实了苹果中的绿原酸等酚酸类物质可以增强小鼠血浆中抗 氧化能力【111;其后,又有报道指出,苹果汁在体内表现出对人类低密度脂蛋白 (LDL)氧化的抑制活性【12】。 蔬菜、水果中的多酚类如绿原酸、咖啡酸等可通过抑制活化酶来抑制致癌 物黄曲霉毒素B1的变异原性【13,141;绿原酸还可通过降低致癌物的利用率及其在 肝脏中的运输来达到防癌、抗癌的效果。绿原酸对大肠癌、肝癌和喉癌具有显 著的抑制作用,被认为是癌症的有效化学防护剂【1 51。Abraham等研究发现绿原 酸抑制射线诱发小鼠骨髓细胞小核,提示绿原酸的抗氧化活性起重要作用【I
61。

近年来,日本学者研究证实了杜仲茶的变异原性抑制作用(Antimutagenicity)-9 杜仲叶所含的绿原酸、京尼平甙、京尼平甙酸等抗变异原性成分有关,揭示杜 仲茶对肿瘤的预防具有重要意义【l 71。Dupont等人【181报道过苹果汁的摄入可以增

第一章咖啡酰李尼酸类天然产物的研究进展

加血浆中酚酸类化合物的浓度,通过用新鲜苹果中提取出来的成分给药,观察 到酚酸类成分有剂量依赖性的抗结肠癌细胞和肝癌细胞增殖的活性【19】。至今为 止,很少人研究过人类结肠中植物性食品中的酚酸类化合物的有效性。有报道 指出:结肠中的抗癌成分已被确定,它们是几种咖啡酰奎尼酸衍生物:绿原酸, 4一D.咖啡酰奎尼酸,3.D-对羟基苯烯丙酰奎尼酸,4一D.对羟基苯烯丙酰奎尼酸, 5-0.对羟基苯烯丙酰奎尼酸[20-23L另外,新鲜苹果中只鉴定出4.D.咖啡酰奎尼 酸和5.D-咖啡酰奎尼酸;而在结肠中亦发现1一D.咖啡酰奎尼酸和3一D.咖啡酰奎 尼酸。这是由于在胃肠道中的肠上皮细胞中的酯酶诱导的异构化作用而导致的。 葡萄糖一6一磷酸酶(Glc一6一Pase)体系在体内平衡血糖调控中发挥重要作用。它 承担着由葡萄糖异生和糖原分解产生内源性葡萄糖的形成。最近,绿原酸被确认

为是大鼠肝微粒体中葡萄糖.6一磷酸移位酶(Glc…6



translocase)的第一个新型特

异性抑制剂【241。绿原酸与大鼠肝脏中微粒体Glc一6.Pase体系相互作用的动力学研 究显示Glc.6.P.translocase为靶分子,而在毫摩尔浓度绿原酸作用下也不影响其他

催化单元,因此绿原酸是迄今发现的第一个Glc…6 translocase天然特异性抑制 剂。Glc一6一P.translocase对6一磷酸葡萄糖的水解起主要的限制作用,Glc…6
P P

translocase活性越高,6一磷酸葡萄糖的水解越多。所以在绿原酸及其合成类似物 存在下,通过测定正常大鼠肝微粒体中6.磷酸葡萄糖的水解程度,来评价这些化 合物对移位酶活性的抑制强度。结果表明:绿原酸3位的改变对抑制作用影响很 小;但在1位上引入含芳香环的亲脂性基团,则使抑制强度增加100倍,即得强效 抑制剂。给大鼠肝脏灌注化合物13天的生物测定分析表明,葡萄糖异生和糖原分 解呈剂量依赖性抑制,Glc.6一Pase作为这类化合物对肝葡萄糖产生抑制作用的干

扰靶标。Glc…6



translocase抑制剂将有利于降低非胰岛素依赖性糖尿病的肝葡萄

糖排出量过高,显示出绿原酸在治疗糖尿病方面的良好前景【251。 娄红祥等从金银花水溶性部分经乙酰化后分得绿原酸四乙酰化物。经药理实 验表明,对四氯化碳(CCl4)引起的小鼠肝损伤有明显的保护作用126]。这为阐明 金银花具有保肝利胆之功效提供了理论依据。近期有报道,从莴苣属植物中分离 出来的绿原酸及3.口咖啡酰奎尼酸都有抗乙肝病毒的活性【2刀。 Eich教授【28】在研究有些植物次生代谢物作为抗逆转录病毒剂时,认为绿原 酸是有希望成为抗艾滋病毒(HⅣ)的先导化合物。这与英国专利报道的杜仲树皮



第一章咖啡酰奎尼酸类天然产物的研究进展

或叶的碱性提取物治疗和预防艾滋病毒感染很有效果的结论相一致【291。 绿原酸作为一种重要的生物活性物质,已经引起国内外学者的广泛关注。日 前绿原酸的主要来源是从天然植物中提取,国外(美、日、德等)大多是从咖啡豆 中提取,而我国以往一直是从金银花中提取。目前我国对于绿原酸的提取纯化以 及开发利用水平还远远落后于发达国家。我国有着丰富的富含绿原酸的植物资 源。如杜仲是我国特有的经济树种,其种植面积广、资源丰富,杜仲叶中绿原酸 的含量一般在5%左右。此外,我国还是向日葵的生产大国,有着极为丰富的葵 粕资源,向日葵籽中的酚酸类化合物70%是绿原酸。这充分说明了我国存在着很 大的开发优势,如果积极开发这些资源,我国将成为绿原酸的开发大国。 1.1.2二咖啡酰奎尼酸类化合物 二咖啡酰奎尼酸类化合物普遍存在于保肝利胆中草药中,其中以菜蓟素 (Cynarin,1,3一二.D-咖啡酰奎尼酸)研究最为广泛。这类化合物大多具有保肝利胆 作用,对巨噬细胞及四氯化碳引起的肝损伤具有保护作用。1,5.二一D.二咖啡酰奎 尼酸(Dicaffeoyl
quinic

acid,[BE一5)为中药旋覆花的有效成分,国内对其药理活性

进行了较为详细的研究,也取得了一定的成果。二咖啡酰奎尼酸类化合物广泛存 在于金银花,栀子等植物中,而菜蓟素则存在于林荫千里光中。1970年左右,二 咖啡酰奎尼酸类化合物如3,5.二一D-咖啡酰奎尼酸、3,4.二.D-咖啡酰奎尼酸、4,5一 二.口咖啡酰奎尼酸,相继从菊科(Compositae)植物中分离得到‘30,311。近年来,在 阔苞菊属、山金车属蒙塔纳、苍耳属类植物中也报道了这些化合物的存在[32-341。 2007年,1,4一二.D_咖啡酰奎尼酸从苍耳属植物中分离出来【351。混合型的咖啡酰奎 尼酸类化合物到80年代才陆续从咖啡豆中分离得到。1985年,3.D.阿魏酰一4一D 咖啡酰奎尼酸经分离得到‘361;1986年,3-0一咖啡酰.4.D阿魏酰奎尼酸从中果咖 啡中分离得到【371;而3.D-咖啡酰.4.D.芥子酰奎尼酸于1987年从茜草科栀子属植 物中分离得到【381;2007年,在药用植物飞蓬中分离得到1.D-丙二酰基.3,5.二.口 咖啡酰奎尼酸,4.0-丙二酰基.3,5一二一口咖啡酰奎尼酸,1.口丙二酰基一4,5.二一D. 咖啡酰奎尼酸,3-0.丙二酰基一4,5.二.口咖啡酰奎尼酸【391;同年又从不同植物中 分离得到4—0.琥珀酰.3,5.二.D咖啡酰奎尼酸【401,从紫苑科藿香蓟中分离得到 3.D.阿魏酰一4.D.对羟基苯烯丙酰奎尼酸,3.D.阿魏酰一5一D.对羟基苯烯丙酰奎尼 酸,4.D.阿魏酰.5一D对羟基苯烯丙酰奎尼酸【411。

第一章咖啡酰奎尼酸类天然产物的研究进展

二咖啡酰奎尼酸类化合物(Dicaffeoyl

quinic

acid,DCQ)同样也具有诸多药

理活性,如抗氧化、抗炎、抗病毒、抗纤维化、抑制平滑肌收缩、降血脂等, 由于其在自然界中的存在较之绿原酸相对较少,所以研究的也没有绿原酸那样 广泛,但是这类化合物的独特生物活性己经引起越来越多人的关注,相信以后 很有可能成为研究热点之一。 .Heilmann和Weiss等利用人中性粒白细胞以酵母多糖或FMLP刺激产生 呼吸爆发,检测氧自由基的生成情况,结果发现DCQ有很强的捕获超氧阴离子 和羟自由基的能力{421。用四氯化碳(CCl4)所致小鼠原位及t.BOOH介导的小鼠 心、肝匀浆化学发光法实验证实,DCQ具有抗过氧化作用。DCQ对黄嘌呤氧化 酶亦有抑制作用,使得次黄嘌呤氧化为黄嘌呤,再氧化为尿酸的过程中所产生 的超氧阴离子减少【431。 用钙离子载体A23187诱导人外周血多形核白细胞白三烯的生成试验中,当 加入DCQ为10一~10。5 mol/L时,白三烯B(LTB)的生成明显减少。白三烯作为 炎症介质,有较强的白细胞趋化作用。DCQ通过对白三烯的合成和释放的抑制 作用而产生抗炎作用【441。DCQ对单核细胞的迁移及超氧阴离子的产生有抑制作 用,同时也具有抑制组胺释放的作用。有报道指出从山艾属植物中分离得到的 3,4.和4,5一二一O.咖啡酰奎尼酸能够抑制小鼠腹膜细胞释放组胺【451,DCQ的这些 作用都将参与其抗炎活性。 从植物Phagnalon rupestre中分离得到的咖啡酰奎尼酸对分叶核的白细胞产 生的胰肽酶E的释放、髓过氧化物酶的活性、超氧化物和白三烯B4的生成的 抑制作用已被证实。其中4,5.二.D.咖啡酰奎尼酸对胰肽酶E的释放有强烈的抑

制作用(半数抑制浓度IC50=4.8州);咖啡酰奎尼酸甲酯类衍生物对髓过氧 化物酶的抑制作用最强(IC50=60小>;奎尼酸甲酯类或游离羧酸类对超氧化
物产生的抑制率相当(IC50=27~42/xM)【461。 先前亦有报道:从日本忍冬中分离得到的3,4一二.D_咖啡酰奎尼酸及其甲酯 类化合物对人类血小板凝集有很强的抑制活性【471。 近期,从柑桔属植物中分离出的4.D-阿魏酰一5一D.咖啡酰奎尼酸及其甲酯类 化合物对小鼠血小板12.LOX有中等抑制活性【481。 DCQ对乙型肝炎病毒(HBV)抗原表达、病毒DNA复制有良好的抑制作用



第一章咖啡酰奎尼酸类天然产物的研究进展

149]。体外实验研究表明,在培养细胞dPDCQ对HBV复制及抗原生成有较强的抑 制作用。抑制培养液dpHbeAg和HbsAg合成和分泌 IC50分别为40-151#mol/L

和40~319#mol/L。DCQ能抑制HBV.DNA聚合酶活性,IC50为27-69#mol/L。采 用鸭肝病毒感染鸭的整体试验模型,对DCQ体内抗乙肝病毒作用的研究结果显 示,给予DCQ第7天时血清病毒DNA水平即开始下降,第14天时明显降低,50 mg/(kg?d)剂量组作用最强。停药5天后病毒DNA仍维持在较低水平。明显低于
生理盐水组和阿昔洛韦组。

近期发现莴苣属植物的地上部分的甲醇提取物有抗HBV保肝活性。在该生 物活性的指引下,分离出7种奎尼酸衍生物,所有化合物在体外抗HBV活性测 定中均显示出较好的活性。在HBV转染的人类肝细胞株HepG2.2.15中,7种 化合物均降低了成熟HBV颗粒的DNA水平,表明它们是潜在的抗HBV的植
物药【271。

2004年,从紫苑中分离出来的3,5.二.D.咖啡酰奎尼酸诱导PCI2细胞的神 经突生长。据报道,细胞外信号调控的Erkl/2激酶及磷酸肌醇(P13)激酶的活 化对神经生长因子(NGF)诱导PCI2细胞分化有着至关重要的作用。DCQ的 作用与NGF的作用机理相似:通过Erkl/2和P13激酶依赖通路促进神经突生长; 另外,DCQ促进Trk A的磷酸化。总之,DCQ是通过Erkl/2和P13激酶的活 化使Trk A磷酸化从而引起PCI2细胞的分化【501。 番薯中分离出来的3,4,5一三.O一咖啡酰奎尼酸的抗血管紧张素转化酶(ACE) 活性,即抗高血压活性最强,接下来是3,4.二.D-咖啡酰奎尼酸及4,5.二.D.咖啡 酰奎尼酸【51】。 近来有报道指出,二咖啡酰奎尼酸有预防或治疗阿尔茨海默病的活性,但 其作用机理并未阐明f521。 美国加州大学就DCQ及其衍生物对AIDS病毒HIV.1的作用进行了较全面的 试验研究‘531。研究结果发现,DCQ能抑制培养组织中HⅣ一1的复制及整合酶的催 化活性,抑制浓度分别为1.9~7 mmol/L和0.1~1.2 mmol/L,中毒浓度是其抗病毒 浓度的100倍以上。进一步研究发现,DCQ对T细胞株中HIV.1的复制也有抑制作 用,浓度为1~6 mmol/L,抑制整合酶的浓度更低,而对T细胞的中毒浓度>120 mmol/L。用不同浓度的HIV—l的整合酶或DNA底物进行滴定试验发现DCQ的作用



第一章咖啡酰李尼酸类天然产物的研究进展

位点在整合酶。动力学分析和透析试验显示,DCQ对整合酶的抑制作用是不可逆 的。现已合成了数十种DCQ类似物并对其细胞毒性,抗病毒活性及对HIV.1整合 酶的抑制作用进行了测试。研究结果发现,多数人工合成的DCQ类似物对培养组 织中HIV.1的整合有明显抑制作用,抑制作用为0.66--.35 mmol/L。鉴于DCQ对 HW一1整合酶较强的选择性抑制作用,可以预见DCQ有可能成为开发抗HⅣ药物 重要的先导化合物[54,55】。
. .

DCQ广泛存在于茜草科、忍冬科,千屈菜科、蔷薇科、马鞭草科、茶科、茄 科、蓼科等植物中,尤其在菊科分布最为普遍。在我国传统中药金银花、旋覆花、 苍耳、扁蓄中均含此成分。此类中药多具有活血抗炎、保肝利胆、抗衰老的功效, 因此,借鉴国外对DCQ等咖啡酰奎尼酸类药理实验研究成果,促进我国传统中药 的开发,可能具有一定的意义。 1.1.3其它咖啡酰奎尼酸类化合物 1983年,TimmermannffX首次从菊属(Chrysothamnus paniculatus)的甲醇提 取物中分离得到了3,4,5.三.O一咖啡酰奎尼酸,并对其结构进行了确证【561。Scholz 及其合作者于1994年从阔苞菊属植物中分离提取出1,3,4,5一四.D.咖啡酰奎尼酸 [571。1,3,5一三.D咖啡酰奎尼酸则于1997年才从菊科向日葵族苍耳属(Xa胛thi“聊
strumarium)dP分离得到‘581。

最近几年,还分到了一类新的咖啡酰奎尼酸化合物,1998年报道从蕃荔枝属 植物中得到了3-0-咖啡酰基一粘奎尼酸(3一O-caffeoyl—muco—quinic acid),此类化合 物的奎尼酸上3位取代基处于平伏键,有异于常见的咖啡酰奎尼酸化合物【591。2000 年从菊科植物东风菜中也分离得到一个3,5.二.D-咖啡酰基.粘奎尼酸
(3,5.dicaffeoyl—muco.quinic acid)【6m。2005年,从旋花科番薯属马鞍藤叶子的乙酸

乙酯部分分离出了2个新化合物,就是3,5.二.D.咖啡酰一4一D.对羟基桂皮酰奎尼酸 和4,5一二一D一咖啡酰一1,3.二.D.对羟基桂皮酰奎尼酸。2007年,从蒙古药用植物鸦 葱中分离得到两个新型的奎尼酸衍生物l,3,4一三.D-咖啡酰奎尼酸和l,3,5.三一O一阿 魏酰奎尼酸(feruloylpodosperimic
acid A和B)t611。

2007年,在菊花中首次分离得到8个咖啡酰奎尼酸糖苷和16个二咖啡酰 奎尼酸糖苷【62】。小花鬼针草中分离得到3,5一z41.0-(5.咖啡酰)奎尼酸基]_4.o-qv 啡酰奎尼酸,经验证,该化合物具有抑制组胺释放的活性,用HPLC.荧光法对

第一章咖啡酰李尼酸类天然产物的研究进展

奎尼酸,咖啡酸和该化合物进行活性测定,结果显示抑制组胺释放的IC50分别 为97
pg/mL;82

p,g/mL;54“g/mL[631。2008年,在菊科植物中分离得到一个含

有4一羟基环己基.2,5一二烯.1一酮结构的咖啡酰奎尼酸类衍生物,它与绿原酸,3,5. 二咖啡酰奎尼酸的生物活性相反:它有促进氧化的活性,Cu2+介导氧化人类低 密度脂蛋白【删。此化合物中的4.羟基环己基一2,5一二烯一1.酮结构很少在天然产物 中存在。


同年,在番薯和金钟藤中都首次分离出3,5.二.D-咖啡酰奎尼酸甲酯,3,4. 二一D咖啡酰奎尼酸甲酯,4,5一二.D咖啡酰奎尼酸甲酯,3,4,5一三.D.咖啡酰奎尼

酸甲酬65?661。
目前发现的咖啡酰奎尼酸类化合物已逐渐增多,但仍有待于在植物中进一步 开发利用以及对其药理活性做相应的研究。
1.1.4结语

咖啡酰奎尼酸类化合物在自然界中广泛存在,绿原酸是其最重要的天然产物 之一。绿原酸及其类似物简单的化学结构,广泛的植物来源和多样的生物活性引 起了国内外诸多研究学者的兴趣。目前国内外主要还是以研究它们的植物化学来 源及药理活性为主,这些研究成果给这类化合物提供了更多丰富的植物资源,并 发现了更多新的生物活性,特别是开发一些在临床极具研究价值的化合物。

1.2本论文的总体设计思路
天然产物在新药发现中占有非常重要的地位。据报道1997年全世界销售 额前25位的药物,有近一半来自天然产物及其衍生物。虽然在20世纪60.80 年代,随着化学工业的发展与进步,从天然产物中开发新药进程放缓,但进入 90年代,人们又重新开始重视天然产物的研究与开发,其主要原因是天然化合 物的结构多样性和独特性。虽然组合化学等化学合成手段为药物的筛选提供了 大量筛选物质,但由于缺乏天然化合物丰富的结构多样性,新药开发的成功率 并没有提高。人们充分认识到天然化合物所具有的独特结构特征,仅通过化学 合成是不可能获得的。因此对天然产物的研究是新药研发中一种不可替代的重 要手段。 咖啡酰奎尼酸作为一类重要的天然产物,由于其结构和活性的多样性,而


第一章咖啡酰夸尼酸类天然产物的研究进展

引起我们的研究兴趣。本论文结合本实验室在天然药物的植物化学分离成果的 基础上,以咖啡酰奎尼酸为先导化合物,运用药物化学分子改造理论,对该天 然产物进行合理的结构改造,希望能得到活性较好的抗肿瘤药物或抗病毒药物, 并能挖掘到其它一些重要的生物活性。在此基础上对化合物的构效关系进行研 究,旨在为该类天然产物的进一步研究提供一定依据。目前一部分合成化合物 的药理活性数据尚在进一步的测试之中。


10

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第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究
2.1研究背景和立题依据
人类使用药物始自于天然物质。“神农尝百草,一日遇七十二毒,得茶而解 之”体现了我国史前对植物药的应用。奎尼酸发现于1790年,最早是从金鸡纳 树皮中提取纯化获得的,故又名金鸡纳酸。奎尼酸是二种具有高使用价值的精 细化工产品和医药中间体,奎尼酸可以促进链球菌的生成,促进心、子宫等器 官组织的发育,还可以作为蚕的饲料添加剂和烟草增香剂的替代品等,其用途 极为广泛【l】。奎尼酸广泛存在于许多植物中,如金鸡纳树、茶树、烟草叶、木 瓜、胡萝b叶、蔓越莓、玫瑰、枇杷果橡树和一些中草药如灯盏花、金银花、 白花刺参、北五味子、北寄奴等;各种蔬菜水果和饮料等中亦含有丰富的奎尼 酸,如马铃薯、苹果、梨、猕猴桃、咖啡和茶等,特别是在猕猴桃中奎尼酸是 主要的有机酸。因此,人们在日常生活中都能从食用的蔬菜、水果、茶和果汁 中或多或少地摄取奎尼酸类物质。 奎尼酸不但以单体的形式存在于植物中,是金鸡纳树皮的主要成分之一, 而且还大量地以复合物的形式存在,如包括咖啡酰奎尼酸类、香豆酰奎尼酸类、 阿魏酰奎尼酸类、咖啡酰奎尼酸酯类等化合物。除了常见的咖啡酰奎尼酸类化 合物以外,奎尼酸还与没食子酰基偶合而形成一类没食子酰奎尼酸化合物。近 年来,对没食子酰奎尼酸化合物的报道日益增多。 没食子酰奎尼酸的生物活性也非常广泛,具有抗病毒、抗肿瘤、抗氧化【21、 治疗肥胖症【3】等活性。1989年,Makoto等【41分离得到4个四取代的没食子酰奎 尼酸化合物,并对其抗病毒活性进行了研究,发现这些化合物既具有抑制HIV 逆转录酶的活性,同时也可以抑制HIV病毒的生长。而具有这两种活性的植物 天然产物从未见报道过。随后该课题组又对二没食子酰取代的奎尼酸类化合物 进行了跟踪研究【5J,其中4,5.二一O.没食子酰奎尼酸具有抑制HIV逆转录酶的活 性。1995年,台湾学者【6】对没食子酰、咖啡酰奎尼酸类化合物的抗病毒机制研 究进行了报道,报道指出,此两类化合物对HIV逆转录酶均有较强的抑制作用, 但是对DNA一多聚酶a的抑制活性不强。1992年,Yoshiki等【7】人报道了没食子 酰奎尼酸类化合物的抗肿瘤活性。

19

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

由于没食子酰奎尼酸类化合物在自然界中存在相对来说不是很广泛,故研 究报道相对较少。但是该类化合物简单的结构和多样化的生物活性也不容忽视。 相信对此类化合物的研究在将来势必可以拥有更美好的前景和广阔的未来。 人类免疫缺陷病毒(HW)是引起人类获得性免疫缺陷综合症(AIDS)的 罪魁祸首,AIDS是影响人类健康最严重的疾病之一。HIV病毒生命周期中的几 个生理环节已成为抗艾滋病治疗的重要靶点。现有很多作用于重要躏;(复制酶、 逆转录酶、HⅣ蛋白酶等等)的抗HIV药物已用于被感染的病人。但是由于 HIV突变种的出现及副作用的产生,使得这些药物存在局限性,这促使人们去 发现更多不同类型的抗HIV药物。 HIV病毒复制的另一个重要环节是将病毒DNA整合到宿主DNA中,这个

环节需要一个很重要的酶——整合酶(integrase,IN)。整合酶的催化作用是产
生子代病毒所必需的,因此,能抑制该酶的药物应该是一个有效的抗艾滋病药 物【8.101。最近,HIV整合酶被公认为一个安全的抗HIV作用靶点,因为没有相 似的酶作用于人体正常细胞,因此对人体正常细胞没有影响【…。

在过去的几年里,在寻找HW整合酶抑制剂方面做出了大量的努力,并产
生了许多HIV整合酶抑制剂。近期有报道:L.菊苣酸(二咖啡酰.L.酒石酸)和 二咖啡酰奎尼酸(DCQA)显示出潜在的抗HIV整合酶活性,并具有中等强度 的抑制HIV复制的活性【12-171。 咖啡酰奎尼酸类是奎尼酸衍生物中比较重要的一类,广泛在于许多中草药 如灯盏花、金银花、白花剌参、北五味子、旋覆花等中。这类药物的重要功能 是抗病毒活性【18-26]。二咖啡酰奎尼酸(Dicaffeoyl
quinic

acid,DCQA)在微摩尔浓

度下即可抑制HIV-1整合酶。DCQA是特殊的整合酶抑制剂,它的抑制活性和 抗HIV活性一致,是筛选抗HIV药物的新靶点整合酶抑制剂的有力武器。 我国学者充分利用现有资源,在这方面的研究已经领先国际水平。国内第 一个具有自主知识产权、能够同时抗乙肝病毒(HBV)和艾滋病病毒(HIV)ff-,J化学 药物1,5.二.D_咖啡酰奎尼酸日前已经开始I期临床研究,有望为我国治疗乙肝 和艾滋病开辟新途径。负责主持研发该药的军事医学科学院放射与辐射医学研 究所董俊兴教授从1994年开始该药的研究,随后发现其同时具有较强的抗乙肝 病毒和艾滋病病毒作用。目前研究发现该药物临床前试验效果好,毒副作用低,

20

第一二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

如果临床研究成功,这将是中国医药界的一颗重磅炸弹。抗艾滋病病毒体内外 试验表明,该药具有显著抑制HIV整合酶的作用,能显著抑制病毒复制,延缓 或逆转猴艾滋病病交,而现有的“鸡尾酒”疗法仅能延缓病变。如在人体中获得 同样效果,这将在很大程度上延长艾滋病患者的生命。同时,抗乙肝病毒的试 验发现,该药能显著抑制病毒抗原的产生和病毒DNA复制,作用比现有治疗 乙肝药物更为持久。据了解,该药已获得我国、美国和欧洲等国发明专利授权,. 并已获得国家食品药品监督管理局颁发的两个化学药一类新药临床研究批文, 并已在解放军302医院进行I期临床研究。 咖啡酰奎尼酸类化合物的活性非常广泛,但是关于其引起不良反应的个例 也有报道,特别是关于绿原酸的致敏作用。早在20世纪60年代就有许多相关 的基础与临床研究。绿原酸是咖啡豆中的重要致敏成分,工人在吸入咖啡豆尘 埃后,发生气喘、皮炎等,经皮试及在志愿者身上被动血清转移试验,确认绿 原酸为致敏成分,但食入未见致敏,经纸色谱和紫外光谱分析,推测绿原酸经 小肠后转化为无致敏活性物质‘271。关于绿原酸的致敏机理,被认为是半抗原物 质,经一定反应与蛋白质上的氨基结合后而具有致敏活性,通过制备绿原酸与 人类血清蛋白的结合物并证实其有高度致敏活性。制备绿原酸与二乙胺的结合 物以阻断绿原酸与氨基结合的活性部位,证明其失去致敏活性。 六棱菊作为一种民间药用植物,具有清热解毒、抗菌消炎等功效,疗效显 著。赵昱课题组从1994年始对六棱菊属植物进行了深入的植物化学和药理研究 [28-33】。前期药理活性研究发现其突出的抗炎活性。进一步跟踪分离得到的活性 成分是二咖啡酰奎尼酸。鉴于实验室植物化学分离的结果,考虑到此类化合物 广泛的生物活性,我们开展了该类化合物结构改造的工作,希望能得到活性更 好的化合物,发现其它重要的药理活性,为新药开发提供一定依据。

2.2咖啡酰奎尼酸衍生物的结构改造设计
咖啡酰奎尼酸类化合物在自然界中广泛存在,绿原酸是其最重要的天然产物 之一。绿原酸及其类似物简单的化学结构,广泛的植物来源和多样的生物活性引 起了国内外诸多研究学者的兴趣。目前国内外主要还是以研究它们的植物化学来 源及药理活性为主,这些研究成果给这类化合物提供了更多丰富的植物资源,并

2l

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

发现了更多新的生物活性,特别是开发了一些在临床极具研究价值的化合物。但 是关于其类似物的合成及结构改造尚未形成研究热点,少有人研究。咖啡酰奎尼 酸类化合物广泛的生物活性必定给其发展带来一定的限制,因此对其进行结构改 造后很有可能发现活性更高,选择性更好的化合物,并可能在这方面的研究中占 领一席之地。 作为初期的工作,我们主要设计思想是以合成绿原酸类似物,即1位取代的 衍生物;5位取代的衍生物;3,4位二取代的衍生物及改变母核类衍生物为主
(Figure 2.1)。通过5个小系列化合物的合成希望找到该类化合物有效的合成方法

及分离手段,同时为下一步的合成设计提供一定的依据。

Chlorogenic acid Figure

2.1对绿原酸分子选取改造的部位

考虑到许多天然的抗氧化物质,如植物多酚、维生素C、尿酸等,容易在 特定条件下表现出原氧化作用,产生活性氧,引起氧化应激,导致DNA损伤 和细胞凋亡。这可能与这些分子结构中的儿茶酚结构相关。而且由于儿茶酚结 构的存在,使得分子与机体内的作用靶点也会增多,毒副作用增大,所以改造 首先选取在苯烯丙酰结构的邻二酚羟基部位,我们将选取其它取代基,如甲氧 基、卤素、硝基等取代基来替代儿茶酚结构,可以考查邻二酚羟基结构是否为 活性必需基团。如果改造成功,还可增加整个分子的稳定性。 另外没食子酰奎尼酸类似物的广泛生物活性也引起了我们的注意,在分子 设计中也希望引入苯甲酰的结构,与苯烯丙酰结构可作对照比较。同样也将没 食子酰上的3个羟基用其它取代基替换。 鉴于二咖啡酰奎尼酸的报道甚多且其生理活性很好,作为二咖啡酰奎尼酸 衍生物合成的初步探索,我们仅设计了3,4位二取代奎尼酸,即在奎尼酸的3,4

第二章咖啡酰夸尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

位引入苯甲酰基或苯烯丙酰基。 奎尼酸的结构中有两类重要的官能团,首先是我们不断进行改造的多个不 同羟基;其次便是1位的羧基。无论在植物化学领域还是在药物合成领域,对 不同取代的奎尼酸甲酯类衍生物的报道甚少。但我们在相关化合物的报道中可 以了解到,将化合物中的羧基甲酯化后活性会有明显改变【341,且羧酸甲酯化后 .可以明显改变其溶解性,带电荷数等物理性质,从而可以影响到药物动力学的 一系列参数。因此,我们尝试合成一系列咖啡酰奎尼酸甲酯类的衍生物,亦可 考察羧基是否为活性必需基团。进行此改造后有可能会得到生物活性及药物动 力学参数更佳的化合物。 依据以上设计,在酰化的位置,兼顾合成的难易程度,先后设计合成在奎 尼酸的不同部位引入苯甲酰基或苯烯丙酰基。 另外,目前对咖啡酰奎尼酸衍生物研究较多的是其抗HIV整合酶活性。在 抗HIV整合酶的三维构效关系研究中发现两个重要的药效团(Figure 2.2),即含 有任何一个药效团的化合物都可能有抗HIV整合酶活性。依据以上结论,加之 目前对菊苣酸的研究日益增多,了解较为透彻,前景较好;咖啡酰奎尼酸衍生 物的分离非常困难等因素,我们考虑合成一系列改变奎尼酸母核而仍然保持其 生物活性的化合物。目前选择乙二醇,L.酒石酸及5.甲基间苯二酚为替代母核。





Pharmaeopbore’:P㈣phoce
矗一271主0。7A a-3.96土O。7A b:8.01+O.7 A b;7.41土0.7 A c=8.73土0.7矗c=8.73皇0.7A Figure 2.2

H≮嘉7
2:

3D构效关系中两个重要药效团116l

综上所述,我们设计以下5个小系列化合物的合成,包括在奎尼酸l,5及

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

3和4位引入苯甲酰基或苯烯丙酰基,还包括对奎尼酸1位羧基甲酯化和对母 核的改变(Figure 2.3)。

OH

oH

oR

0H

TM.1

TM.2

TM.3

TM.4

肛趋或飞
Figure

2.3设计合成的5小系列化合物

2.3咖啡酰奎尼酸衍生物的合成路线设计
由于咖啡酰奎尼酸类化合物广泛存在于自然界,目前主要是提取分离获得, 对其植物化学研究及药理活性研究很是广泛,但关于该类化合物合成的报道相对 则较少。 1955年,Panizzi等人报道了绿原酸的首次化学合成,该法采用奎尼酸为原料, 经过七步反应,总产率小于5%。此法明显的不足之处就是借助了一个不合适的 奎尼酸前体化合物骨架,致使多步都需要使用羟基的保护策略及后续繁琐的酸碱 性脱保护基操作,而绿原酸在碱性条件下很容易被氧化,因此整个过程导致产率
很低【351。

Hemmerle等人在1997年为了研究绿原酸及其衍生物对葡萄糖.6.磷酸酶 (Glc一6一Pase)体系的抑制活性,合成了一批咖啡酰奎尼酸类化合物的衍生物【361。 在合成中同样也使用了一个奎尼酸前体化合物骨架,但使用的都是酸敏感的保护 基,避开了在碱性条件下的水解。所以合成产率有所提高,达到22~32%。合成
路线见Scheme 2.1。

24

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究







Reagents and condition:a)Cyclohexanone,H2S04,’75%;b)SEMCI,diisopropylethylaimne,98%;

c)NaOH,dioxane,95%;d)CDI,NaH,DMF,40-85%;e)aqueous
70~90%. Scheme 2.1

hydrochloric acid,dioxane,

Hemmerle等报道的奎尼酸衍生物合成方法

研究发现,若改变芳香环上取代基则可形成更强效的抑制剂,如引入4一氯苯 基丙基侧链,得到的化合物的IC50(对葡萄糖.6.磷酸酶(Glc.6一Pase)体系的抑制活

性)达2.5蒯,是绿原酸的100倍。绿原酸醚化物酯基部分经改造所得化合物活性
都远强于绿原酸。目前,进一步优化先导化合物的研究工作正在进行,可望创新 成治疗非胰岛素依赖性糖尿病药物。由此可见对咖啡酰奎尼酸类化合物的构效关 系研究是很有意义的一项工作,目前涉及这方面的研究还比较少。 直至]2001年,Sefkow才对绿原酸的合成进行再次报道f371。Sefkow认为有效 合成绿原酸最关键的方面是如何获得合适保护的奎尼酸中间体以及采用酸敏感 的保护基。因此咖啡酸部分采用的是乙酰基保护;奎尼酸部分的保护作者试用了 多种策略及条件,最后分析得到以下的条件是最佳的得到绿原酸的奎尼酸中间 体。



Reagents and

condition:a)Me3SiCI,Et3N,CH2C12,95%;b)Acetone,DMP,TMS—OTf,CH2C12.

第二章咖啡酰夸尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

Scheme 2.2

Setkow等报道的奎尼酸衍生物合成方法

最后将两部分成酯,水解即得绿原酸,产率高达65%。此法为绿原酸的化学 合成提供了一条有效的方法。 同时该课题组对另外三个单取代的咖啡酰奎尼酸类化合物的合成也做了相 应的研究【3引。采用的合成策略都是寻找合适的奎尼酸前体化合物,文中探索了 一些保护基的应用,对这类化合物的合成有很好的参考价值。 绿原酸及其异构体之间还可以在适当的条件下相互转化【391,因为自然界中 绿原酸来源丰富,而且绿原酸现也有商品可供应。因此利用绿原酸与其异构体之 间的转化和制备相应其他的几个单取代咖啡酰奎尼酸类化合物也不失为一条好
的途径。

2000年董俊兴等人对l,5.二.D.咖啡酰奎尼酸衍生物的合成制备申请了专利 保护1401。在合成中采用了一个保护3、4位双羟基的奎尼酸前体化合物,保留1, 5位羟基和咖啡酸酯化,最后脱去保护基而得目标化合物。 日本学者Kondo等人于2005年在四面体快报上发表了13个绿原酸类似物的 合成,也采用的是与Sefkow相似的保护策略和合成方法【411。 随着多取代咖啡酰奎尼酸的不断报道,其合成也日益增多。其中重要中间体 奎尼酸内酯的制备较为突出。奎尼酸内酯的制备最初FisherE421于1921年阐明; 后又第一次I圭/Gero等人【43】改进,在IR.120大孔树脂的存在下,以N,N.二甲基甲酰 胺作为溶剂,加热奎尼酸(80%产率);而后Pei
qiang

Huang[441等人又对其进行改

进:在对甲苯磺酸的存在下,以甲苯为溶剂对奎尼酸加热(90%产率)。 参考以上文献,对于咖啡酰奎尼酸衍生物的合成最关键的是得到合适的中间 体化合物,结合设计的5小系列分子,我们需要得到2个关键中间体,其需要采用 不同策略保护不同位置的羟基,从而在预期的反应位点引入取代的苯甲酰或苯烯 丙酰基。缩合采用的方法文献多见是酰氯法,即首先将取代苯甲酸或苯烯丙酸与 氯化亚砜反应成酰氯,再与奎尼酸中间体缩合而成。同时也有文献报道偶合试剂 CDI作缩合试剂的。按照我们以前常采用的偶合试剂,我们试用了DCC,DMAP 体系作偶合试剂,也能得到满意的结果,该方法从未见文献报道过。对于合成咖 啡酰奎尼酸衍生物比较重要的一步是如何脱去奎尼酸分子中的保护基而得到目 标化合物,对于酸敏感的保护基文献上报道的多见是1 mol/L或2 mol/L的盐酸,

第二章咖啡酰夸尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

我们在合成中也分别都进行了尝试和摸索。


H,‘

R卜㈣<2。…, 卜㈣加弋。。n一.,



H0∥”
OH OR

TM.1

TM.4



H/
0H TM.2 O

肛《、1或



≮.

Figure

2.4五系列咖啡酰奎尼酸衍生物合成路线设计

2.4咖啡酰奎尼酸衍生物的合成
2.4.1

1位取代的咖啡酰奎尼酸衍生物的合成 咖啡酰奎尼酸衍生物的合成最关键是得到合适的中间体,要对除反应部位

外的其他羟基进行合理的保护,使其与各种取代苯甲酸或苯烯丙酸缩合时,反 应有较高的选择性,缩合后再脱去保护基,得到所需的化合物。 制备1位取代的化合物,我们需要的是除1位以外的其他羟基均被保护的 中间体,用丙酮与其缩合,在酸性条件下1位羧酸与5位羟基同时也生成内酯 环,因此可得到1位羟基裸露的中问体2.1,反应中使用了无水硫酸钠作除水剂, 丙酮必需作严格的无水处理。由于奎尼酸极性较大,在丙酮等中等极性的溶剂 中溶解性不好,所以可适当延长反应时间,运用以上改进的方法可使产率提高
到60%左右。

第二章咖啡酰奎尼陵衍生物的设计及合成的初步研究


RCOoH o









?



黔极或飞
Reagents and condition:a)Acetone,conc.H2S04,reflux,63%;b)DCC,DMAP,CH2C12,rt,6 h;

CDI,DBU,THF,45 oC,10 h;c)1.5N HCl,CH30H,ref.5h.

Scheme 2.3

1位取代的咖啡酰奎尼酸衍生物的合成

将3,4一丙酮叉奎尼酸内酯2.1与各种不同取代的苯甲酸和苯烯丙酸在二环己 基羰二亚胺(DCC)和4一二甲氨基吡啶(DMAP)存在下或在Ⅳ'Ⅳ,-羰基二咪唑(CDI), 1,5一二氮杂二环[5,4,o】十一烷一5一烯(DBU)存在下通过酯化反应制备得到。我们采 用了CDI/DBU和DCC/DMAP两种体系,发现使用DCC/DMAP效果比较好,对于 该类化合物的分离可采用硅胶柱层析分离得到。 为了探明结构与活性之间的关系,我们采用11种易得的羧酸为原料,包括对 对甲氧基苯甲酸、对氯苯甲酸、对溴苯甲酸、对甲基苯甲酸、3,5一二硝基苯甲酸、 2,4一二氯苯烯丙酸、2,6.二氯苯烯丙酸、对甲氧基苯烯丙酸、3,4一二甲氧基苯烯丙 酸、3.(2.呋喃基)烯丙酸及3.苯甲酰烯丙酸分别与2.1反应制备得到2.2 ̄2.12,当用 含硝基等吸电子取代基的羧酸时,从TLC显示有新点生成,但是分离很困难,产 率较低,目前还在进一步优化之中。 丙酮叉等保护基是对酸敏感的取代基,为了能方便除去丙酮叉保护基,并 将内酯环打开,我们试用了不同浓度的盐酸,当用2 mol/L的盐酸时,容易分
解成原料;采用1 mol/L的盐酸,反应时间需要较长时间,目前采用1.5
mol/L

第一二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

的盐酸成功制备得到目标化合物2.13~2.20,但是数目尚少,产率较低,需要继 续摸索,优化条件,更好的制备该类化合物。目标化合物可采用多次Sephadex
LH.20凝胶柱分离而得。
Table

2.1目标化合物2.2—2.20取代基的结构式

本系列合成化合物2.1 ̄2.20,包括中间体11个,目标产物8个,共20个 化合物。其中2.1已被报道,其他19个均为新化合物。
2.4.2

5位取代的咖啡酰奎尼酸衍生物的合成 5位取代的咖啡酰奎尼酸衍生物和天然存在的绿原酸具有相同的取代位置,

鉴于绿原酸广泛的生物活性,而咖啡酸的儿茶酚结构即是其活性基团也可能是 毒性基团,因此设计时我们将其咖啡酸部分的儿茶酚结构用其他取代基替换, 希望能探明儿茶酚部分是否为活性必需基团,同时也可降低整个分子的毒性。 对此系列化合物的制备运用了两种策略,使用不同的苯甲酸为原料,继续

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

运用2.1这个中间体,让其在碱性条件下打开内酯环,裸露出5位羟基成中间 体a,虽然分子中1和5位的羟基均裸露在外,但是其进一步与取代苯甲酸反 应时,由于5位羟基的活性与1位羟基的位阻,使得反应优先发生在5位,这 样就成功制得5位取代的苯甲酰奎尼酸衍生物。同样我们也试用了CDI/DBU和 DCC/DMAP两种缩合反应体系,但是中间体a在四氢呋喃中溶解性不好,导致 反应并不能得到缩合产物,故采用DCC/DMAP作缩合剂,分离和水解的条件 采用和前一系列相同的条件。





贮埝.或飞
Reagents and condition:a)Acetone,conc.H2S04,reflux,63%;b)NaOH,dioxane,HCI;c)DCC,

DMAP,CH2C12,rt,24 h;d)1.5 mol/L HCl,CH30H—THF—H20,refi,lh.

Scheme 2.4

5位苯甲酰基取代的咖啡酰奎尼酸衍生物的合成

使用不同的苯烯丙酸为原料时,利用奎尼酸5位的高反应活性,直接与奎尼 酸在偶合试剂作用下反应,结果显示5位发生取代的产物最多,这样就可以省去 运用繁琐的保护策略与脱保护的条件,不失为一个比较好的方法。但这样势必增 加分离的困难,需采用多次Sephadex LH.20和RP.C18分离而得。日前本系列化合 物只分离得到4个纯品,故分离仍是一个很重大的问题,有待于进一步研究和探
讨。

30

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究



H矿。

R2


R3

贮℃或.
R.

Reagents and

condition:a)DCC,DMAP,CH2C12,rt,24 h;CDI,DBU,THF'45 oC,lO h.

Scheme 2.5
Table

5位取代的咖啡酰奎尼酸衍生物的合成

2.2目标化合物2.21~2.24取代基的结构式

本系列合成化合物2.21~2.24,共4个,均为新化合物。 2.4.3.5位取代咖啡酰奎尼酸甲酯类衍生物的合成 天然咖啡酰奎尼酸中有两个重要的官能团,即羟基(酚羟基、醇羟基)和羧 基。在以上的改造中我们用不同的羧酸将咖啡酸进行取代来证实酚羟基是否为 其必需基团;现在我们将奎尼酸中的羧基进行甲酯化,来探明羧基是否为其必 需基团,并进一步探明咖啡酰奎尼酸甲酯类衍生物的活性是否会有所增强。

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究








H oH



233.2.37

肛毽.或飞
Reagents and condition:a)Acetone,cone.H2S04,reflux,63%;b)NaOCH3,CH30H,0。C-rt,5h;

c)DCC,DMAP,CH2C12,rt,6h;d)1.5 moFL HCI,CH30H—THF—H20,ref.,lh. Scheme 2.6

5位取代咖啡酰奎尼酸甲酯类衍生物的合成

将3,4.D.异丙叉奎尼酸内酯2.1与甲醇钠在甲醇溶剂中反应得到另一重要 中间体3,4.D-异丙叉丙酮叉奎尼酸甲酯2.25,再将2.25与不同的苯甲酸和苯烯 丙酸在二环已基羰二亚胺(DCC)和4一二甲氨基吡啶(DMAP)存在下通过酯化反
应制备得到。

为了探明结构与活性之间的关系,我们采用7种易得的羧酸为原料,包括对 氯苯甲酸、对溴苯甲酸、对甲基苯甲酸、3,5.二硝基苯甲酸、2,4一二氯苯烯丙酸、 2,6.二氯苯烯丙酸、对甲氧基苯烯丙酸分别与2.5反应制备得到2.26--2.32。 化合物2.26~2.32中既有丙酮叉的保护又有甲酯的保护,而两个保护基对酸都 较为敏感,为了能方便除去丙酮叉保护基,并不破坏甲酯,我们借鉴1位取代咖 啡酰奎尼酸类化合物合成的经验,试用了较低浓度的盐酸,并尝试缩短反应时间。 经不断摸索最终采用1 mol/L的盐酸,反应1小时成功制备得到目标化合物 2.33~2.37。目标化合物可采用多次Sephadex LH.20柱分离而得。
Table
Compounds

2.3目标化合物2.26~2.37取代基的结构式


Compounds



第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

本系列合成化合物2.25~2.37,包括中间体7个,目标产物5个,共13个 化合物。其中2.25已被报道,其他12个均为新化合物。 2.4.4.3,4位二取代咖啡酰奎尼酸衍生物的合成 通过查阅文献发现,二咖啡酰奎尼酸类化合物的种类繁多且活性尚佳,因

此我们目前也对此类化合物进行初步探索——合成一类3,4位二取代咖啡酰奎
尼酸衍生物。
O O

Il

ll



RV


啪伽RV0、、
O 2.44/2.46 O

ll

R丫0、
o o 2.39-2.43/2.45



RV0、
o O



R-

q.≯门R

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

Reagents and condition:a)230℃,1 5min,80%;b)DCC,DMAP,CH2C12,rt,6h;c)1.5 mol/L HCl, CH30H-THF—H20,ref.,3h.

Scheme 2.7

3,4位二取代咖啡酰奎尼酸衍生物的合成

由于1一羟基的空间位阻较大,反应活性低,因此只需将5一羟基进行保护。 为了将5.羟基保护起来得到一个合理的中间体,我们这次不引进其他保护基, 而是进行分子内酯化:1.羧基与5.羟基进行内酯化,得到二环t内酯,即l,5. 奎尼酸内酯2.38。
’ ’

在对甲苯磺酸的存在下,以甲苯为溶剂对奎尼酸加热得到奎尼酸内酯2.38 产率虽高,可是在实际操作中并不理想:反应得到棕黄色粘稠物,不易分离纯 化而导致产率较低。后采用热熔法制备,反应操作简单,反应时间短,经重结 晶可得较纯产物2.38。再将2.38与不同的苯甲酸和苯烯丙酸在二环己基羰二亚 胺(DCC)和4一二甲氨基吡啶(DMAP)存在下通过酯化反应制备得到2.39~2.46。 由于1一羟基未被保护,其中还是有小部分进行反应得到1,3,4.三取代奎尼酸内 酯,分离得到三取代奎尼酸内酯2.44和2.46。 为了将内酯环打开又不破坏反应形成的酯键,还是采用酸性条件下水解。 但是由于空间位阻等因素,目前只得到两个目标产物2.47-2.49,且产率低,需 要继续摸索,优化条件,以得到满意的结果。
Table

2.4目标化合物2.39—2.49取代基的结构式

本系列合成化合物2.38~2.49,包括中间体8个,目标产物3个,共12个

34

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

化合物。其中2.38已被报道,其他11个均为新化合物。 2.4.5.替代母核化合物的合成 目前研究较多的是L.菊苣酸(即:二咖啡酰酒石酸)。菊苣酸的分离;制备 及其抗HIV-I整合酶活性(IC50约为O.8—1.19M)都已经研究的较为透彻[20,21]。 报道指出咖啡酰结构中的邻苯二酚部分在整个分子的抑制活性中起着相当 重要的作用,但其自身并无任何抗病毒活性。只有与分子中的其它基团共同作 用形成上述药效团的空间结构后才会发挥作用;并且过多的酚羟基必然会带来 较大的毒性。因此为了寻找高效低毒的新的先导化合物,我们考虑将L.菊苣酸 中的咖啡酰部分进行改造:将其改造成为不同取代的苯烯丙酰。从合成出来的 咖啡酰奎尼酸衍生物的活性数据中发现,苯烯丙酰结构中的碳碳双键有利于整 个分子形成大共轭,使整个分子的生物活性有着明显的提高。因此我们在改变 母核系列中只采用不同取代的苯烯丙酰,而不用苯甲酰。 另外,报道中还指出,将酒石酸的羧基甲酯化并同时将羟基进行酰化反应 后所得到的分子仍然有抗HIV-1整合酶的活性。由于我们是将酒石酸甲酯化后 在进行酰化反应,分子中既有酯基又有酰基,在最终的脱保护中遇到了难题: 脱去甲基的同时反应上去的苯烯丙酰也随之脱下,产率极其低。综合以上原因, 我们在本系列中合成了3个不同取代的苯烯丙酰酒石酸甲酯。希冀得到活性较 佳的化合物。 在我们合成的三个该系列化合物2.50—2.52中,仅有2.51是已经报道过的 【451,但其报道的方向是在于讲述电解液中进行非对映立体选择性合成,并不是 在于讲述苯烯丙酰酒石酸甲酯的抗HIV一1整合酶活性。

∞×佣一“3c><m志如c><如
肛埝.或飞
condition:a)CH30H,conc.H2S04,ref.,5h;b)DCC,DMAP,CH2C12,rt,6h.
Scheme 2.8

Reagents and

以酒石酸为取代母核的化合物的合成

在对菊苣酸的研究不断成熟的同时,人们又对菊苣酸的类似物是否有抗 HIV-1整合酶活性这个问题产生了兴趣。在研究过程中发现了一个基本的结构

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

骨架【21】(Figure 2),即用一个连接体将两个芳香化合物连接起来形成一个有抗 HIV-1整合酶的生物活性分子。



Linker



General Structure I

秽 ‰



L-(十Chicoric

acid



Figure 1。General structure 1 which summarizes features commoFl to many agents that Inhibit HIV integrase in Isolated enzyme preparations。with compounds 1-3 representing specific examples.

Figure

2.5基本骨架【2l】

通过对菊苣酸中连接体的不断简化,得到了一系列的有较高生物活性的菊 苣酸类似物。其中包括保留菊苣酸一个羧基的;将两个羧基用烷基或环烷基替 代的;将两个羧基直接去掉的以及将两个羟基之间连接链增长的等不同系列, 在此中间最弓}人注目的就是二咖啡酰乙二醇了,其抗HIV-1整合酶的IC50达到 0.4I_tM,是菊苣酸的2.3倍,但是它的毒性很大,于是受到了限制。因此我们考 虑将该化合物进行改造,减少酚羟基以降低整个分子的毒性,用不同取代的苯 烯丙酰替代咖啡酰。 在我们合成的三个该系列化合物2.53.2.55中,2.53和2.54已经被报道【46,471, 但其报道的方向仍然是在讲述光化学反应中肉桂酸的异构体的选择性合成或将 苯烯丙酰乙二醇作为形成大环化合物的原料,并不是在讲述苯烯丙酰乙二醇的
36

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

抗HIV一1整合酶活性。

HO



!.
RCOOH

oH



肛乜.或飞

Scheme 2.9

以乙二醇为取代母核的化合物的合成

根据对文献的学习发现,两个羟基的间的中心连接分子的结构与大小都会 影响整个分子的生物活性,两羟基之间间隔的碳数越多,活性就会越低。经过 酒石酸和乙二醇的替换后,我们考虑改造成为两羟基之间间隔三个碳且中心连 接分子为环状化合物的类似物。因此选择了5一甲基间苯二酚作为替代母核。 到目前为止还未有二苯烯丙酰一5一甲基间苯二酚的抗HIV-1整合酶活性的相 关报道。仅有一篇文献在讲述制备3,5一二羟基甲苯磷酸酯或其他有机酸酯作为 辐射防护剂时涉及到2.56和2.57[481。
oH OR

a -------------’

RCOOH HO CH3 RO 2.56-2.58

肛毽.∥闷

Reagents and

condition:a)DCC,DMAP,CH2C12,n,6h.

Scheme2.10以5.甲基间苯二酚为取代母核的化合物的合成
Table
Compounds

2.5目标化合物2.50~2.58取代基的结构式


2.5112.53/2.56

2.52/2.54/2.57

婚坶
37

2.ss岭≯~夸删,
本系列合成化合物2.50~2.58,共9个,其中2.51;2.53;2.54;2.56;2.57

第一二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

已被报道,其他4个均为新化合物。 2.4.6.关于咖啡酰奎尼酸衍生物合成的小结 本章节一共合成中间体26个,日标产物24个,共58个化合物。其中50 个为新化合物。 尽管咖啡酰奎尼酸类化合物结构比较简单,但是从以上5小系列化合物合成 的初步探讨过程中,我们意识到该类化合物无论在合成还是分离阶段都具有很大 的挑战性,面临着不少问题,亟需解决,特别是脱去保护基和分离的问题值得更 深入的研究和改进。目前所做的工作仅仅是很小的一部分,对于奎尼酸分子其它 部位的改造也有待于进一步展开。 奎尼酸在天然产物的合成中的应用仍然在不断地给全球化学家们以灵感。在 近几年中奎尼酸的应用已得到迅猛发展,以其为原料,经简单便利的方法合成出 大量的目标产物。事实上,利用奎尼酸上多样的官能团有可能使环上每个碳都可 成为反应位点,并有可能引入新的有立体选择性的一系列官能团。另外,奎尼酸 还可以将六元环开裂成为一个无环结构,然后再环化成为五元环、七元环或八元 环结构。咖啡酰奎尼酸类衍生物的研究前景十分广阔,我们仍需进一步的摸索与 研究。

2.5实验部分
2.5.1仪器与试剂原料 NMR及13C NMR在Bruker

1H

Advance 400

MHz核磁共振仪上测定,TMS为
Esquire

内标,偶合常数均用赫兹(Hz)表示;质谱在Bruker

3000+(ESI)上测定。

所用试剂均为分析纯;反应试剂如无特别指明,均经无水处理;薄层色谱 (TLC)采用高效色谱硅胶GF254(青岛海洋化工厂生产)。
2.5.2化合物合成的一般步骤

取代咖啡酰奎尼酸类衍生物的合成一般步骤:
方法一:

向反应瓶中加入取代苯烯丙酸或苯甲酸(o.58 mm01),ⅣⅣ,-羰基二咪唑(1
mg,o.58

19

mm01),四氢呋喃8 mL,回流反应2 h,再向其中加入奎尼酸或保护的
1R

第二章咖啡酰夸尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

奎尼酸中间体(o.47 mm01),l,5-二氮杂--环[5,4,0】十一烷一5一烯(DBU)(90

mg,o.58

mm01),整个溶液再回流反应8 h。脱溶得到淡黄色粘稠状固体,用硅胶或反相 RP.C18多次分离而得。
方法二:

向反应瓶中加入取代苯烯丙酸或苯甲酸(o.49 mm01),二环己基碳二亚胺
(100 mg,O.49 mm01),二氯甲烷8 mL,在室温下搅拌20 rain,出现白色混浊后,

加入奎尼酸或保护的奎尼酸中间体(O.39 mm01),4.二甲氨基吡啶(DMAP)(10
0.049

mg,

mm01),整个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶

得到白色固体,用硅胶或Sephadex LH.20多次分离而得。 2.5.3中间体化合物的制备和合成系列衍生物的理化波谱 3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.1)
3,4-O-isopropylidene-I,5-quinide(2.1)

反应瓶中加入奎尼酸(500

mg,2.6 mm01),无水硫酸钠(2.5 g,17.6 mm01),15

mL无水丙酮,搅拌数分钟,再向反应瓶中滴加3肚浓硫酸,加热回流5 h。冷
却到室温,加入碳酸氢钠调节pH约为7,抽滤除去不溶物,滤液浓缩。脱溶所 得固体分散在3 mL氯仿和3 mL蒸馏水中,水层再用氯仿萃取3次(5 mLx3), 合并所有有机相,用水洗,饱和食盐水洗涤数次,无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除 去溶剂得白色固体,在乙酸乙酯中重结晶得白色粉末350 mg;产率63%:mp:
130--1320C;1H

NMR(400 MHz,CD30D):8 1.29(3 H,s,CH3),1.46(3 H,S,CH3),
H,ddd,

2.00--2.49(4 H,m,H一2,6),4.27(1 H,dd,H-4),4.50(1 H,m,H一5),4.65(1
H一3);

1.氧.(4.甲氧基苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.2) 1一D(4-methoxybenzoyl)-3,4一O-isopropylidene-I,5-quinide(2.2)
方法一:

向反应瓶中加入对甲氧基苯甲酸(1

8 mg,O.12

mm01),ⅣⅣ,-羰基二咪唑(38

mg,0.23mm01),无水四氢呋喃8 mL,回流2 h,再向其中加入保护的奎尼酸2.1(20
mg,O.093

mm01),l,5一二氮杂二环[5,4,o]十一烷一5.烯(DBU)(18

mg,O.12 mm01),

整个溶液回流反应8 h。脱溶得到淡黄色粘稠状固体,柱层析纯化(石油醚/乙酸

乙酯=10:1,粗品/硅胶=1:40)分离得到白色固体10 mg;产率为3l%;mp:

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

63-64。C,Rf(石油醚/L酸乙酯=3:1):0.49;‘H NMR(400 MHz,CDCl3):6 1.35(3
H,s),1.55(3 H,s),2.49 ̄2.68(4 H,m,H一2,6),3.87(3 H,S,OCH3),4.37(1 H一4),4.59(1 H,m,H一5),4.83(1 H,ddd,H一3),6.92(2 (2
H,d,,/--8.8 H,d,Jr-8.8 H,dd,

Hz,H-3,'5’,8.00

Hz,H-2:63;

方法二:

向反应瓶中加入对甲氧基苯甲酸(21
(29mg,O.14 mm01),无水二氯甲烷8

mg,0.14

mm01),二环己基碳二亚胺

mL,在室温下搅拌20 min,出现白色混浊 mm01),4-二甲氨基吡啶(DMAP)(1.7
mg,

后,加入保护的奎尼酸2.1(20
0.014

mg,0.093

mm01),整个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶

得到白色固体,柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1,粗品/硅胶=1:40)分离得到 白色固体12 mg,产率为37%。 1.氧一(4.氯苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.3)
1-D-(4-chIorobenzoyl)一3,4-0一isopropylidene一1,5-quinide(2.3)

白色固体16 mg,产率为49%;mp:68-70。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯=
3:1):0.68;1H NMR(400 MHz,CDsOD):6 1.35(3 H,S,CH3),1.54(3 H,S,cn3), 2.48-3.13(4 H,m,H一2,6),4.36(1 H,dd,H一4),4.59(1 H,m,H一5),4.85(1 H一3),7.37(2
H,d,√三8.8 H,ddd,

Hz,H-3,,5’,7.97(2

H,d,J=8.8

Hz,H一2,,6I);

1.氧.(4.溴苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.4) 1一仇(4一bromobenzoyl)-3,4-O-isopropylidene-I,5一quinide(2.4) 白色固体28 m岛产率为76%;mp:83-86。C(CHCl3);Rf(石油醚/L酸乙酯=
3:1):0.61;1H NMR(400 MHz,CD30D):8 1.30(3 H,S,CH3),1.49(3 H,S,CH3), 2.25—3.30(4 H,m,H-2,6),4.39(1 H,dd,H一4),4.68(1 H,m,H一5),4.83(1 H-3),7.45(2
H,d,J=8.8 H,ddd,

Hz,H-3:5’,7.97(2 H,d,J=8.8 Hz,H-2',6’;

1一氧.(4.甲基苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.5)
1-0一(4一methylbenzoyl)-3,4-D—isopropyHdene-1,5一quinide(2.5)

白色固体II mg,产率为36%;mp:70-73。C(CHCl3);Rf(石油醚/L酸乙酯=
3:1):0.55;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.30(3 H,S,CHs),1.53(3 H,S,CHs), 2.41(3 H,S,CHs),2.49-3.16(4 H,m,H-2,6),4.36(1 H,dd,H一4),4.59(1 H一5),4.83(1 H,ddd,H一3),7.25(2
H一2’,6,);
H,m,

H,d,户8.0

Hz,H一3,'5 J),7.92(2 H,d,./--8.0 Hz,

1.氧一(3,5.二硝基苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.6)

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

1-O一(3,5一dinitrobenzoyI)-3,4-0一isopropyHdene-l,5-quinide(2.6)

白色固体29 mg,产率为76%;mp:102-103。C(CHCl3);Rf(石-油醚/乙酸乙酯
=3:1):0.58;’H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.38(3 H,S,CH3),1.56(3 H,S,CH3), 2.66---3.20(4 H,m,H一2,6),4.40(1 H,dd,H一4),4.63(1 H,m,H一5),4.90(1 H-3),9.15(2 H,S,H一2:65,9.26(1 H,S,H一4,);
H,ddd,

l一氧一13-(2,4-二氯苯)烯丙酰l一3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.7)
1一I巴}-(2,4-dichlorocinnamoyl)-3,4—0一isopropylidene-l,5-quinide(2.7)

白色固体12 mg,产率为31%;mp:110-~111。C(CHCl3);Rf(;fi-油醚/L酸乙酯
=3:1):0.67;1H NMR(400 Mnz,CD30D):6 1.43(3 H,S,CH3),1.62(3 H,S,CH3), 2.51-3.20(4 H,m,H-2,6),4.43(1 H,dd,H-4),4.65(1 H,m,H一5),4.90(1 H一3),6.51(1
J=1.6 H,ddd, H,d,

H,d,户16.0 Hz,H一2I),7.37(1

H,d,J--1.6

Hz,H一8,),7.53(1

Hz,H一9’,7.63(1 H,S,H-6I),8.14(1

H,d,./--16.0

Hz,H一3,);

1.氧.13.(2,6.二氯苯)烯丙酰卜3,4.氧.异丙叉奎尼酸一1,5.内酯(2.8)
1一D一(2,6-dichlorocinnamoyl)-3,4—0-isopropylidene一1,5-quinide(2.8)

白色固体26 mg,产率为68%;mp:115-118。C(CHCl3);Rf(石-油醚/L酸乙酯
=3:1):O.60;1H NMR(400 N,"H--Iz,CD30D):6 1.35(3 H,S,CHs),1.55(3 H,S,CHs),
2.5 1-3.1 4(4

H,m,H一2,6),4.36(1 H,dd,H一4),4.57(1 H,m,H一5),4.83(1
H,d,J--16.0

H,ddd,

H-3),6.66(1

Hz,H一2’,7.21(1 H,m,H-7'),7.36(2 Hz,H一3’;

H,d,J=8.0 Hz,

H一6:8’,7.86(1

H,d,./--16.0

l一氧一13一(4一甲氧基苯)烯丙酰1.3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.9)
l-O-(4-methoxycinnamoyl)-3,4-O-isopropylidene-I,5-quinide(2.9)

白色固体15 mg,产率为43%;mp:98-99。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.70;‘H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.33(3 H,S,CH3),1.89(3 H,S,CHs),2.33-3.10(4 H,m,H一2,6),3.86(3H,S,OCHs),4.36(1 H,dd,H-4), 4.65(1 H,m,H-5),4.83(1 H,ddd,H一3),6.42(1
J=8.8 H,d,.I=16.0

Hz,H-2,),6.99(2

H,d,

Hz,H-6:8,),7.68(2

H,d,./--8.8

Hz,H一5,,9J)7.71(1

H,d,J=16.0

Hz,H一3J);

1。氧.【3.(3,4.二甲氧基苯)烯丙酰卜3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.10) 1一伊(3,4-dimethoxycinnamoyl)-3,4-O-isopropylidene-1,5一quinide(2.10) 白色固体9 mg,产率为24%;mp:105-108。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.43;‘H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.35(3 H,S,CHs),1.55(3 H,S,CH3),2.30-3.12(4 H,m,H一2,6),3.91(3H,S,OCH3),3.92(3H,S,OCH,),4.35 (1 H,dd,H一4),4.57(1 H,m,H-5),4.82(1 H,ddd,H一3),6.3l(1
H,d,./--16.0 Hz,

4l

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

H?2,),6.86(1 7.67(1

H,d,J=8.0

Hz,H一89,7.05(1 H,S,H一5|),7.11(1

H,d,,/--8.0

Hz,H一93,

H,d,J=16.0

Hz,H-3,);

1一氧一13.(2.呋喃基)烯丙酰1.3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.11)
1-O一(3一furylacryloyl)-3,4-O-isopropylidene-1,5-quinide(2.11)

黄色固体26 mg,产率为84%;mp:89-90。C(CHCl3);Rf(石油醚/7,酸乙酯
=3:1):0.36;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.33(3 H,s,CH3),1.43(3 H,s,CH3), 2.33~3.10(4 H,m,H-2,6),4.37(1 H,dd,H一4),4.65(1 H,m,H一5),4.84(1 H一3),6.26(1
H,d,J=16.0 H,d,J=16.0 H,ddd,

Hz,H-2'),6.56(1 H,s,H一6,),6.75(1 H,s,H一5,),7.36(1

Hz,H-33,7.66(1 H,s,H?7’;ESI-MS m/z:351.91([M+NI--14]+);

1.氧.(3.苯甲酰基烯丙酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸.1,5.内酯(2.12)
1-O-(3-benzoylacryloyl)-3,4-O-isopropylidene-1,5-quinide(2.12)

黄色油状物15 mg,产率为43%;Rf(CHCl3/CH30H/HC02H=50:2:1):O.56;
1H

NMR(400 MHz,CD30D):6 1.33(3 H,s,CHs),1.51(3 H,s,CH3),2.4¨3.11(4
H,

H,m,H一2,6),4.39(1 H,dd,H-4),4.68(1 H,m,H一5),4.87(1 H,ddd,H-3),6.79(1
d,,/=16.0

Hz,H一29,7.57(2 H,m,H-7,,99,7.72(1 H,t,H一89,8.02(1

H,d,J--16.0

Hz,H一3J),8.09(2 H,m,H一6:10J);ESI—MS m/z:390.14([M+NH4]+);

1.氧.(4一甲氧基苯甲酰).奎尼酸(2.13)
1-O-(4-methoxybenzoyl)-quinic acid(2.13)

在二颈瓶中加入化合物2.2(20 水体系(3:1:1),再滴加5d

mg,O.057

mm01),加入5mL甲醇.四氢呋喃.

1.5 mol/L

HCl,加热回流7h,由TLC检测到产物和

原料比不再变化为止,冷却至室温,用二氯甲烷萃取,合并氯仿层用大量水洗, 饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥。用Sephadex LH.20多次分离得到白色固体8
mg,产率为43%;mp:84,--870C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/HC02H=50:2:1):O.1
1H 8;

NMR(400 MHz,CD30D):6 2.28~3.14(4 H,m,H一2,6),4.07(1 H,dd,H-4),4.20
H,d,,/--8.4

(1 H,m,H一5),4.96(1 H,ddd,H一3),6.92(2
,/--8.4

Hz,H一3,,59,8.00(2

H,d,

Hz,H一2,'6,);

1.氧.(4.氯苯甲酰).奎尼酸(2.14)
1-O-(4-chlorobenzoyl)一quinic acid(2.14)

白色固体10 mg,产率为53%;mp:136-137。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.15;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.29-3.12(4 H,m,H一2,6), 4.07(1 H,dd,H一4),4.21(1 H,m,H-5),4.97(1 H,ddd,H一3),7.43(2

H,d,户8.0

Hz,

42

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

H-3,,5I),7.98(2

H,d,./--8.0

Hz,H一2,'6,);

1.氧.(4.溴苯甲酰)一奎尼酸(2.is) 1-仉(4一bromobenzoyl)一quinic acid(2.15) 白色固体7 mg,产率为37%;mp:145-147。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.16;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.28~3.13(4 H,m,H一2,6), 3.39(1 H,dd,H一4),3.87(1 H,m,H—s),4.11(1 H,ddd,H-3),7.72(2 H一3,,5’,7.96(2
H,d,,/--8.8 H,d,,/--8.8 Hz,


Hz,H一2,,6’;

1.氧.(4.甲基苯甲酰).奎尼酸(2.16)
1-O-(4-methylbenzoyi)-quinic acid(2.I 6)

1.氧一(3,5.二硝基苯甲酰).奎尼酸(2.17)
I-0-(3,5一dinitrobenzoyI)一quinic acid(2.17)

白色固体8 mg,产率为42%;mp:130-133。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):O.18;‘H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.27-3.19(4 H,m,H一2,6), 3.86(1 H,dd,H一4),4.25(1 H,m,H一5),5.02(1 H,ddd,H一3),9.17(2 H,S,H-2,'6,), 9.25(1 H,S,H一4,);

1.氧.【3.(2,4.二氯苯)烯丙酰卜奎尼酸(2.18)
1-D-(2,4-dichlorocinnamoyl)-quinic acid(2.1 8)

白色固体11 mg,产率为58%;mp:135-136。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.15;‘H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.18-2.87(4 H,m,H-2,6), 3.04(1 H,dd,H-4),3.78(1 H,m,H-5),4.02(1 H,ddd,H一3),6.60(1 H一29,7.37(1 8.OO(1
H,d,J--8.4 H,d,Jr_16.0 Hz,

Hz,H-8'),7.55(1 H,S,H-6’,7.79(1

H,d,J=8.4

Hz,H-9'),

H,d,3"--16.0 Hz,H一3,);

1.氧.13一(2,6.二氯苯)烯丙酰卜奎尼酸(2.19)
1-0一(2,6一dichlorocinnamoyl)一quinic acid(2.19)

白色固体1 5 mg,产率为79%;mp:141~143。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):O.17;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.25~3.12(4 H,m,H一2,6), 3.86(1 H,dd,H一4),4.09(1 H,m,H一5),4.64(1 H,ddd,H一3),6.67(1 H-2J),7.39(1 H,m,H一7,),7.52(2 H,m,H-6,,8,),7.87(1
H,d,./--16.4 H,d,J=l 6.4 Hz,

Hz,H一3,);

1.氧.(3.苯甲酰基烯丙酰).奎尼酸(2.20) 1-D(3-benzoylacryloyl)-quinic acid(2.20) 黄色固体5 mg,产率为27%;mp:113~115。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.22;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.13-3.03(4 H,m,H.2,6),

43

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

3。60(1 H,dd,H一4),3.93(1 H,m,H一5),4.57(1 H,ddd,H?3),6.80(1

H,d,J=16.0 Hz, H,

H-23,7.52(2 H,m,H一7,,9’,7.66(1 H,m,H一89,7.93(2 H,m,H一6,,103,7.98(1
d,J--16.0

Hz,H一3,);

5.氧.(4.甲氧基苯甲酰).奎尼酸(2.21)
5-0-(4-methoxybenzoyl)一quinic acid(2.21)

向反应瓶中加入对甲氧基苯甲酸(60

mg,0.39

mm01),二环己基碳二亚胺(80 min,出现白色混浊后,

mg,O.39 mm01),无水二氯甲烷8 mL,在室温下搅拌20

加入奎尼酸(20

mg,O.26 mm01),4一二甲氨基吡啶(DMAP)(5 mg,0.04 mm01),整

个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶得到白色固体,凝 胶柱纯化(CHCl3/CH30H=1:1),分离得到白色固体10 mg,产率为11%;mp:
120--1230C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/HC02H=50:2:1):0.19;‘H NMR(400 MHz, CD30D):6 2.16—2.36(4 H,m,H一2,6),3.90(3 H,S,OCH3),4.39(1 H,dd,H一4),4.68 (1 H,m,H一5),4.87(1 H,ddd,H-3),7.04(2 H,S,H-3:5’,8.06(2 H,S,H一2:6’;

5.氧.(4.溴苯甲酰).奎尼酸(2.22)
5-0-O-bromobenzoyl)-quinic acid(2.22)

白色固体27 mg,产率为28%;mp:158-160。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.1 8;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.50 ̄2.69(4 H,m,H一2,6), 4.39(1 H,dd,H一4),4.68(1 H,m,H-5),4.87(1 H,ddd,H一3),7.52(2 H,S,H-3:5’, 7.64(2 H,S,H一2,,6,);

5-氧一【3.(2,4.二氯苯)烯丙酰卜奎尼酸(2.23)
5-0-(2,4-dichlorocinnamoyl)-quinic acid(2.23)

白色固体30 mg,产率为29%;mp:142-145。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HCOzH=50:2:1):0.17;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.09-2.28(4 H,m,H一2,6), 4.39(1 H,dd,H一4),4.68(1 H,m,H一5),4.87(1 H,ddd,H?3),6.28(1 H,d,H一29,7.32 (1 H,m,H一89,7.49(1 H,d,H?9’),7.56(1 H,S,H一69,7.92(1 H,d,H一3J);

5.氧.(3.苯烯丙酰)奎尼酸(2.24)
5-O-cinnamoylquinic acid(2.24)

白色固体26 mg,产率为31%;mp:99-101。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.19;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.01~2.34(4 H,m,H一2,6), 4.39(1 H,dd,H-4),4.68(1 H,m,H-5),4.87(1 H,ddd,H-3),6.61(1 H,d,H一23, 7.41-7.76(5 H,m,H一5:6:7:8:99,7.77(1 H,d,H-3,).

3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.25)

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

methyl 3,4-0-isopropylidene quinate(2.25)

在二颈瓶中加入化合物2.1(40

mg,O.1 8

mm01),加入2mL无水甲醇将其溶解,

再于冰浴下将2 mL甲醇钠的甲醇溶液缓慢地滴入反应体系中,待滴加完毕后撤 去冰浴使整个体系恢复到室温,反应5h,由TLC检测到产物和原料比不再变化 为止。冷却至OoC,小心地滴加2d冰醋酸,再加饱和氯化铵调PH至中性,用二 氯甲烷萃取,合并有机层用大量水洗,饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥。用
Sephadex

LH一20多次分离得到白色固体18 mg,产率为41%;Rf(CHCl3/CH30H/

HC02H=50:2:1):0.43;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.37(3 H,S,CH3),1.54(3 H,S,CHs),1.76~2.65(4 H,m,H一2,6),3.8 1(3H,s,COOCHs),3.98(1 H,dd,H-4), 4.13(1 H,m,H-5),4.47(1 H,ddd,H-3);

5.氧.(4.氯苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.26)
methyl 5-O-(4-ehlorobenzoyl)-3,4-0-isopropylidene quinate(2.26)

向反应瓶中加入对氯苯甲酸(19
o.12

mg,O.12

mm01),二环己基碳二亚胺(25

mg,

mm01),无水二氯甲烷6 mL,在室温下搅拌20 min,出现白色混浊后,加
mg,0.08

入3,4一丙酮叉奎尼酸甲酯2.25(20
mg,0.01

mm01),4.二甲氨基吡啶(DMAP)(1.2

mm01),整个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱

溶得到白色固体,柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1),分离得到白色固体24 mg,产率为78%;mp:83-85。C(CHCl3);Rf(石油醚/L酸乙酯=3:1):0.20;1H
NMR(400 MHz,CD30D):6 1.36(3 H,S,CH3),1.65(3 H,S,CHs),2.1乱3.24(4 m,H-2,6),3.78(3 H,S,COOCH3),4.21(1 H,dd,H一4),4.35(1 H,m,H一5),4.56(1 ddd,H一3),7.66(2
H,d,./--8.0 H, H,

Hz,H一3,,5,),7.92(2

H,d,J=8.0

Hz,H一2:6,);

5.氧.(4.澳苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.27)
methyl 5一O-(4-bromobenzoyl)-3,4-O-isopropylidene quinate(2.27)

白色固体30 mg,产率为87%;mp:91-92。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯=
3:1):0.18;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.38(3 H,S,CHs),1.61(3 H,S,CHs), 2.36-3.14(4 H,m,H一2,6),3.77(3 H,S,COOCHs),4.1 1(1 H,dd,H?4),4.28(1 H,m, H-5),4.58(1 H,ddd,H-3),7.57(2
H一2,'6,);
H,d,J=8.0

Hz,H一3:5,),7.90(2

H,d,./=-8.0 Hz,

5.氧.(4.甲基苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.28)
methyl 5-O-(4-methylbenzoyl)-3,4一O-isopropylidene quinate(2.28)

白色固体12 mg,产率为41%;mp:69-72。C(CHCl3);Rf(,E油醚/乙酸乙酯=

45

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

3:1):0.21;‘H NMR(400 Mnz,CD30D):6 1.25(3 H,S,CH3),1.52(3 H,S,CH3), 2.42(3 H,S,CH3),2.66-3.45(4 H,m,H-2,6),3.75(3 H,S,COOCHs),4.30(1 H一4),4.49(1 H,m,H一5),4.58(1 H,ddd,H一3),7.22(2 (2
H,d,J--8.0 H,d,J--8.0 H,dd,

Hz,H一3,'59,7.92

Hz,H一2:6,);

5一氧一(4.甲氧基苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.29)
methyl

5-O-(4-methoxybenzoyl)-3,4-D—isopropyndene quinate(2.27)

白色固体10 mg,产率为33%;mp:77-79。C(CHCl3);Rf(石-油醚/L酸乙酯=
3:1):0.10;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.43(3 H,S,CH3),1.65(3 H,S,CHs), 2.32-3.50(4 H,m,H一2,6),3.91(3 H,S,OCH3),3.92(3 H,S,C00CHs),4.33(1 dd,H-4),4.54(1 H,m,H一5),4.62(1 H,ddd,H-3),6.98(2 8.10(2
H,d,J=9.2 H,

H,d,./--9.2 Hz,H一3,’5 9,

Hz,H-2:6,);

5.氧.(3,5.二硝基苯甲酰).3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.30)
methyl 5-0-(3,5一dinitrobenzoyl)一3,4一O-isopropylidene quinate(2.30)

白色固体33 mg,产率为94%;mp:96-98。C(CHCl3);Rf(石油醚/L酸乙酯=
3:1):0.18;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.40(3 H,S,CH3),1.62(3 H,S,CH3),
2.45-3.5 1(4

H,m,H?2,6),3.82(3 H,S,COOCH3),4.08(1 H,dd,H一4),4.35(1 H,m,

H一5),4.60(1 H,ddd,H-3),9.17(2 H,S,H-2’,63,9.24(1 H,S,H一4,);

5一氧.【3.(2,4.二氯苯)烯丙酰卜3,4.氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.31)
methyl

5-o-(2,4-dichloroeinnamoyl)一3,4一O-isopropylidene quinate(2.31)

白色固体32 mg,产率为90%;mp:89-90。C(CHCl3);Rf(4S油醚/7.酸乙酯=
3:1):0.16;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.38(3 H,S,CH3),1.52(3 H,S,CH3), 2.34~3.47(4 H,m,H一2,6),3.80(3 H,S,COOCH3),4.09(1 H,dd,H一4),4.22(1 H,m, H-5),4.54(1 H,ddd,H一3),6.41(1 H一8I),7.44(1 H,S,H-69,7.53(1
H一3,);
H,d,√r_16.0

Hz,H一29,7.27(1

H,d,J--8.4 Hz,

H,d,户8.4 Hz,H一99,8.02(1

H,d,J=16.0 Hz,

5.氧.13.(2,6.二氯苯)烯丙酰卜3,4一氧.异丙叉奎尼酸甲酯(2.32)
methyl

5-o-(2,6-diehlorocinnamoyl)-3,4-O-isopropylidene quinate(2.32)

白色固体35 mg,产率为98%;mp:94~95。C(CHCl3);Rf(石油醚/L酸乙酯=
3:1):0.25;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.30(3 H,S,CHs),1.58(3 H,S,CHs),
2.16-3.10(4 H,m,H一2,6),3.80(3 H,S,COOCH3),4.23(1 H,dd,H-4),4.49(1 H,m,

H一5),5.50(1 H,ddd,H?3),6.61(1
J--8.0

H,d,卢16.4 Hz,H-29,7.17(1 H,t,乒8.0
Hz,H-6,,89,7.81(1
H,d,./--16.4

Hz,

Hz,H一79,7.34(2

H,d,J=8.0

Hz,H一3,);

第二章咖啡酰奎尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

5-氧.(4-氯苯甲酰)-奎尼酸甲酯(2.33)
methyl

5-伊(4?chlorobenzoyl)-quinate(2.33)
mg,O.052

在二颈瓶中加入化合物2.26(20 水体系(3:1:1),再滴加5d
1.5 mol/L

mm01),加入5mL甲醇一四氢呋喃.

HCl,加热回流1.5h,由TLC检测到产物和

原料比不再变化为止,冷却至室温,用二氯甲烷萃取,合并有机层用大量水洗, 饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥。用S印hadeX LH.20多次分离得到白色固体
12

mg,产率为67%;mp:148~1500C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/HC02H=50:2:1):

0.28;1H

NMR(400 MHz,CD30D):6 2.1肚3.08(4 H,m,H一2,6),3.46(1 H,dd,H一4),
H,d,,/--8.8

3.75(1 H,m,H-5),3.82(3 H,S,COOCHs),4.12(1 H,ddd,H-3),7.41(2 Hz,H-3,,5,),7.98(2
H,d,J=8.8

Hz,H一2,,6I);

5.氧.(4.澳苯甲酰).奎尼酸内甲酯(2.34)
methyl 5—6I-(4一bromobenzoyl)-quinate(2.34)

黄色固体14 mg,产率为77%;mp:155-156。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.21;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.14 ̄3.01(4 H,m,H一2,6), 3.75(1 H,dd,H-4),3.82(3 H,S,COOCHs),4.1 0(1 H,m,H一5),4.24(1 H,ddd,H一3), 7.57(2 H,d,户8.8 Hz,H-3:5,),7.91(2
H,d,J=8.8

Hz,H一2:6I);

5.氧.(3,5.二硝基苯甲酰).奎尼酸甲酯(2.35)
methyl 5一C}-(3,5-dinitrobenzoyl)-quinate(2.35)

白色固体17.5 mg,产率为96%;mp:143-145。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.24;1H NMR(400 MHz,CD30D):6
2.1 3---2.93(4 H,m,H一2,6),

3.85(1 H,dd'H?4),3.88(3 H,S,COOCHs),3.91(1 H,m,H一5),4.27(1 H,ddd,H一3), 9.19(2 H,S,H一2:6I),9.25(1 H,S,H一4I);

5-氧-【3一(2,4.二氯苯)烯丙酰卜奎尼酸甲酯(2.36)
methyl 5-0-(2,4-dichloroeinnamoyl)-quinate(2.36)

白色固体14.4 mg,产率为79%;mp:149-151。C(CHCl3);Rf(CHClffCH30H/
HC02H=50:2:1):0.27;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.09--3.02(4 H,m,H一2,6), 3.69(1 H,dd,H-4),3.82(1 H,m,H-5),3.85(3 H,S,COOCH3),4.16(1 H,ddd,H一3), 6.45(1 (1
H,d,,/--16.0

Hz,H一2’,7.28(1

H,d,./--8.4

Hz,H一8’,7.45(1 H,S,H一6,),7.55

H,d,J=8.4

Hz,H?9,),8.04(1

H,d,J=16.0 Hz,H-3,);

5一氧一13.(2,6.二氯苯)烯丙酰卜奎尼酸甲酯(2.37)
methyl 5-0-(2,6-diehloroeinnamoyl)-quinate(2.37)

白色固体11 mg,产率为61%;mp:156-.-157。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
47

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

HC02H=50:2:1):0.13;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.08-3.06(4 H,m,H-2,6), 3.71(1 H,dd,H-4),3.79(1 H,m,H-5),3.82(3 H,S,COOCH3),4.24(1 H,ddd,H一3), 6.65(1
./--8.0

H,d,户16.4 Hz,H?23,7.20(1
H,d,J=16.4

H,t,./--8.0 Hz,J--8.0

Hz,H-7'),7.36(2

H,d,

Hz,H一6,'8’,7.84(1

Hz,H-3’;

1,5.奎尼酸内酯(2.38)
1,5-Quinide(2.38)

向干燥反应瓶中加入奎尼酸(500

mg,2.60

mm01),于230。C加热至熔融,待

完全熔化后,继续加热10min,迅速将反应瓶置于干燥器中冷却(由无色液体变 为棕褐色玻璃状)。在用冰醋酸重结晶得到白色固体407mg,产率为90%;mp:177
-1780C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/HC02H=50:2:1):0.25;1H NMR(400 MHz, CD30D):6 1.66--2.22(4 H,m,H一2,6),4.57(1 H,dd,H一4),4.77(1 H,m,H一5),5.1 5 (1 H,ddd,H一3);

3,4.二.氧.(4.甲氧基苯甲酰).1,5.奎尼酸内酯(2.39) 3,4一di一伊(4-methoxybenzoyI)-1,5-quinide(2.39) 向反应瓶中加入对甲氧基苯甲酸(43
mg,0.28

mm01),二环己基碳二亚胺(58

mg,0.28mm01),无水二氯甲烷6 mL,在室温下搅拌20min,出现白色混浊后,

加入奎尼酸内酯2.38(20

mg,O.1 l

mm01),4一二甲氨基吡啶(DMAP)(3.6

mg,0.03

mm01),整个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶得到白 色固体,柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=6:1),分离得到白色固体12 mg,产率为
23%;mp:143-145。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯=3:1):0.26;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.33-2.70(4 H,m,H一2,6),3.82(3 H,S,OCHs),3.90(3 OCHs),5.50(1 H,dd,H?4),5.43(1 H,m,H一5),5.79(1 H,ddd,H一3),6.79(2
J--8.8 H,S, H,d,

Hz,H一3:5’,6.96(2

H,d,J--8.8

Hz,H-3,,,5’’,7.80(2 H,d,J--8.8 Hz,H一2:6,),

8.OO(2 H,d,户8.8 Hz,H一2,,’6’,);

3,4.二.氧.13.(2.呋喃基)烯丙酰卜1,5一奎尼酸内酯(2.40)
3,4-di-0-(3-furylacryloyl)-I,5-quinide(2.40)

黄色固体16 mg,产率为35%;mp:156-157。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯
=3:1):0.21;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 1.57-2.54(4 H,m,H一2,6),4.84(1 dd,H-4),5.06(1 H,m,H?5),5.47(1 H,ddd,H一3),6.03(1 6.25(1
H,d,./--16.0 Hz,H一2 7’,6.45(1 H,d,J---16.0 H,

Hz,H一2,),
H,S, Hz,

H,S,H一65,6.51(1 H,S,H一6’’,6.69(1

H一5,),6.80(1 H,S,H-5’’,7.31(1 H一3’,),7.57(1
H,S,H一7 5,7.65(1

H,d,户16.0 Hz,H一3,),7.50(1 H,d,户16.0

H,S,H-7’,);ESI—MS m/z:449.26([M+NH4]+);
48

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

3,4.二.氧.(3.苯甲酰基烯丙酰).1,5.奎尼酸内酯(2.41)
3,4一di-O一(3一benzoylacryloyl)-I,5一quinide(2.41)

3,4.二.氧.【3.(2,4.二氯苯)烯丙酰卜1,5.奎尼酸内酯(2.42) 3,4一di-仇(2,4-dichlorocinnamoyl)-I,5-quinide(2.42) 白色固体15 mg,产率为24%;mp:169-171。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯
=3:1):0.23;‘H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.08-2.50(4 H,m,H一2,6),4.90(1 dd,H一4),5.12(1 H,m,H一5),5.53(1 H,ddd,H一3),6.44(1 6.70(1
H,d,J=16.0 H,

Hz,H一25,

H,d,户16.0 Hz,H?2 7J),7.29(1
Hz,H一9’’,7.93(2

H,d,J=8.4

Hz,H一83,7.36(1
H,d,J---8.4

H,d,户8.4Hz,
H,

H-8 7,),7.42(1 d,,/--8.4

H,S,H-6’,7.50(1 H,S,H-6’’,7.76(1
H,d,,/=16.0 Hz,H一3,'3 7,);

Hz,H-9'),7.83(1

3,4.二.氧.13.(2,6.二氯苯)烯丙酰卜1,5.奎尼酸内酯(2.43)
3,4一di—D一(2,6-dichlorocinnamoyl)-I,5-quinide(2.43)

白色固体20 mg,产率为32%;mp:176--,177。C(CHCl3);Rf(石-油醚/乙酸乙酯
=3:1):0.25;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.27~2.62(4 H,m,H一2,6),4.99(1 dd,H一4),5.33(1 H,m,H-5),5.72(1 H,ddd,H一3),6.54(1 6.68(1 7.77(1
H,d,./--16.4 H,d,.1=16.4 H,d,,/--16.4 H,

Hz,H-25,

Hz,H一2’J),7.19(2 H,m,H一7,,7’’,7.35(4 H,m,H一6,,8,,6’:8 7J), Hz,H-3’,7.88(1
H,d,J=16.4 Hz,H一3 7I);

l,3,4-三一氧.13.(2,6----氯苯)烯丙酰卜1,5.奎尼酸内酯(2.44)
1,3,4一tri-O-(2,6-dichlorocinnamoyl)-I,5-quinide(2.44)

白色固体10 mg,产率为12%;mp:190---195。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯
=3:1):0.14;1H NMR(400 MI-Iz,CD30D):6 2.19-3.39(4 H,m,H一2,6),5.26(1 dd,H-4),5.38(1 H,m,H一5),5.79(1 H,ddd,H一3),6.53(1 6.66(1
H,d,J=16.4 H,d,,1=1 6.4 H,

Hz,H一2”’,

Hz,H一2’’,6.72(1

H,d,J=16.4

Hz,H一2I),7.38(3 H,m,H一7,,7,,, Hz,H一3”J),7.85(1
H,

7”I),7.48(6 H,m,H一6:8:6,,,8’:6”,,8”’,7.75(1
d,./--16.4

H,d,J=16.4

Hz,H-3’’,7.92(1

H,d,./--16.4

Hz,H一3,);

3,4.二.氧.13。(4.甲氧基苯)烯丙酰卜1,5.奎尼酸内酯(2.45)
3,4-di-O-(4-methoxycinnamoyl)-I,5-quinide(2.45)

白色固体10 mg,产率为18%;rap:147~150。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯
=3:1):0.28;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.1乱2.61(4 H,m,H-2,6),3.82(3 OCHs),3.84(3 H,S,OCHs),4.95(1 H,dd,H-4),5.17(1 H,m,H-5),5.38(1 H-3),6.30(1
H,d,,/=16.0 H,S,

H,ddd, H,d,

Hz,H一23,6.54(1
H,d,./--8.8

H,d,J--16.0

Hz,H.2’’,6.89(2

户8.8 Hz,H-6:8,),6.99(2

Hz,H-6,,,8’,),7.55(2

H,d,,/--8.8 Hz,H.5:9,),

49

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

7.57(1

H,d,./=16.0

Hz,H一35,7.68(2

H,d,户8.8 Hz,H一5,,'9’’,7.76(1

H,d,./--16.0

Hz,H一3’,);ESI—MS

m/z:5 1 2.06([M+NH4]+);

1,3,4.三.氧.【3.(4.甲氧基苯)烯丙酰卜1,5.奎尼酸内酯(2.46)
1,3'4-tri-D-(4-methoxycinnamoyl)-I,5-quinide【2.46)

白色固体9 mg,产率为13%;mp:188-190。C(CHCl3);Rf(;6油醚/L酸乙酯=
3:1):0.12;‘H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.55-3.20(4 H,m,H-2,6),3.81(3
H,S,

OCHs),3.85(3 H,S,OCHs),3.86(3 H,S,OCHs),5.02(1 H,dd,H一4),5.38(1 H,m, H?5),5.71(1 H,ddd,H一3),6.21(1 H一2’,),6.40(1
H,d,./=16.0

Hz,H一2”,),6.35(1

H,d,./=16.0 Hz, H,d,

H,d,户16.0 Hz,H-25,6.81(2

H,d,J=8.8

Hz,H-6”,’8"5,6.93(4

J,_8.8 Hz,H-6',8:6,,'8 7,),7.45(2 H,d,J--8.8

Hz,H-5":9”’,7.50(2
H,d,3"--16.0

H,d,J=8.8 Hz,

H一5,’9’,5,,,9’,),7.60(1

H,d,户16.0 Hz,H一3”I),7.71(2

Hz,H一3,,3’’;

3,4.二.氧.【3.(2一呋喃基)烯丙酰1.奎尼酸(2.47)
3,4一di-O一(3-furylacryloyl)-quinic acid(2.47)

在二颈瓶中加入化合物2.40(20 水体系(3:1:1),再滴加5d
1.5 mol/L

mg,O.048

mm01),加入5mL甲醇一四氢呋喃一

HCl,加热回流3h,由TLC检测到产物和原

料比不再变化为止,冷却至室温,用二氯甲烷萃取,合并有机层用大量水洗,饱 和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥。用Sephadex LH.20多次分离得到黄色固体17
mg,产率为82%;mp:184---t870C(DMSO);Rf(CHCl3/CH30H/HC02H=50:2:1):
0.20;1H

NMR(400 MHz,CD30D):6 2.80,--3.20(4 H,m,H一2,6),4.70(1 H,S,OH一5),
H,d,3"--16.0 Hz, H,

4.97(1 H,dd,H-4),5.21(1 H,m,H?5),5.40(1 H,ddd,H一3),5.56(1

H一2t,2’’,5.74(1 H,S,OH一1),6.19(2 H,m,H一6,,6’J),6.62(2 H,m,H一5 r,5’,),6.94(2 m,H-7t,7’’,7.44(2
H,d,J=16.0

Hz,H一3"3’I);

3,4.二.氧.(3.苯甲酰基烯丙酰).奎尼酸(2.48)
3,4一di-O-(3一benzoylacryloyl)-quinic acid(2.48)

3,4.二.氧.13.(2,6.二氯苯)烯丙酰卜奎尼酸(2.49)
3,4一di-O-(2,6-dichlorocinnamoyl)-quinic acid(2.49)

2,3.二.氧.13.(2,4.二氯苯)烯丙酰卜L.酒石酸二甲酯(2.50)
dimethyl

2,3-di—o-(2,4-dichlorocinnamoyl)一tartrate(2.50)
mgo 3.3 ret001),无水硫酸钠(1.5 g,10.6 mm01),
h。

反应瓶中加入L-酒石酸(500
10

mL无水甲醇,搅拌数分钟,再向反应瓶中滴加3肛L浓硫酸,加热回流10

冷却到室温,加入碳酸氢钠调节pH约为7,抽滤除去不溶物,滤液浓缩。脱溶 所得固体分散在3 mL氯仿和3 mL蒸馏水中,水层再用氯仿萃取3次(5 mLx3),
气n

第二章咖啡酰夸尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

合并所有有机相,用水洗,饱和食盐水洗涤数次,无水硫酸钠干燥。减压蒸馏除 去溶剂得L一酒石酸二甲酯白色固体390 mg;产率66%; 向反应瓶中加入2,4.二氯苯烯丙酸(61
mg.0.28 mm01),无水二氯甲烷8 mg,O.28

mm01),二环己基碳二亚胺(58

mL,在室温下搅拌20 min,出现白色混浊后,
mg,O.03

加入L-酒石酸二甲酯(20 mg,O.11 mm01),4一二甲氨基吡啶(DMAP)(3.6

mm01),整个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶得到白 色固体,柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1),分离得到白色固体49 mg,产率 为77%;mp:66~67。C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯=6:1):O.4;1H NMR(400 MHz,
CD30D):6 3.82(6 H,S,COOCH3),5.88(2 H,S,H一2,3),6.54(2 H.2,,2’,),7.29(2
H,d,J--2.0 Hz,H-8,,8 7,),7.46(2 H,d,./--2.0 H,d,,I=16.0 Hz,H一3,’3 7’;ESI—MS H,d,J=16.0 Hz,

Hz,H?9,'9’,),7.60(2

H,S,H一6:6’,),8.14(2

m/z:449.21(【M+NH4】1’);

2,3.二.氧.(3.苯烯丙酰).L.酒石酸二甲酯(2.51)
dimethyl 2,3-di-O-cinnamoyltartrate(2.51)

无色油状物42 mg,产率为87%;Rf(石油醚/乙酸乙酯=6:1):o.2;1H NMR
(400 MHz,CD30D)"6 3.81(6 H,S,COOCH3),5.91(2 H,S,H-2,3),6.58(2
./--16.0 Hz,H一2,,2 7I),7.42(6 H,d,

H,m,H-6,,7,,8,,6,,'7’,,8 7,),7.58(4 H,m,H-5,’9,’5 7,, m/z:456.05([M+NH4]+);

9 7I),7.80(2 H,d,,/=1 6.0 Hz,H?3:3 7I);ESI—MS

2,3.二.氧.(4.甲氧基苯甲酰).L.酒石酸二甲酯(2.52)
dimethyl 2,3-di-O-(4-methoxybenzoyl)一tartrate(2.52)

无色油状物35 mg,产率为71%;Rf(石油醚/L酸乙酯=3:1):O.36;1H NMR
(400 MHz,CD30D):6 3.75(6 H,S,COOCHs),3.91(6 H,S,OCHs),5.94(2 3),7.08(4
H,d,J=8.8 H,S,H一2,

Hz,H一3,'5,,3’,,5’’,8.03(4

H,d,,/--8.8 Hz,H-2:6,,2,,'6 7,);

ESI—MS m/z:463.93([M+NH4]+);

1,2.二.氧.苯烯丙酰.L--醇(2.53)
1,2一di-O-cinnamoylethanediol(2.53)

向反应瓶中加入苯烯丙酸(144
0.97

mg,O.97

mm01),二环己基碳二亚胺(200

mg,

mm01),无水二氯甲烷lOmL,在室温下搅拌20min,出现白色混浊后,加
mg,O.1

入乙二醇(20 mg,0.32 mm01),4一二甲氨基吡啶(DMAP)(12

mm01),整个溶

液在室温下反应2d,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶得到白色固体,柱层析 纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1),分离得到白色固体68 mg,产率为66%;mp:
71-720C(CHCl3);Rf(石油醚/乙酸乙酯=3:1):0.6;1H NMR(400 MHz,CD30D):6

51

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

4.37(4 H,S,H—l,2),6.35(2

H,d,./--16.0

Hz,H-2:2’,),7.29(6 H,m,H一6,,7,,8:6,,'
H,d,./=16.0 Hz,H-3,,3 7’;ESI—MS

7,,,8’-),7.41(4 H,m,H-5,,9’,5,,,9’,),7.60(2 m/z:339.93([M+NH4]+);

1,2.二.氧.13.(4.甲氧基苯)烯丙酰卜乙二醇(2.54)
1,2-di-D-(4-methoxycinnamoyl)-ethanediol(2.54)

白色固体73 mg,产率为60%;mp:140-1410C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30I-U
HC02H=50:2:1):0.6;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 3.84(6 H,S,OCH3),4.48(4 H,S,H一1,2),6.35(2 8'5,7.48(4
H,d,J=16.0

Hz,H一2,'2’,),6.90(4

H,d,J=8.8 Hz,H一6,’8,,6,,,

H,d,,/--8.8 Hz,H-5:9’,5,,,9 7’,7.68(2 H,d,,/--16.0 Hz,H一3,’3

7,);

ESI—MS m/z:399.87([M+NH4]+);

1.氧.【3.(4.甲氧基苯)烯丙酰1.2.氧.4.甲氧基苯甲酰.乙二醇(2.55) 1一伊(4-methoxycinnamoyl)-2—0-(4-methoxybenzoyl)-ethanediol(2.55) 白色固体95 mg,产率为83%;mp:103~105。C(CHCl3);Rf(CHCl3/CH30H/
HC02H=50:2:1):0.48;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 3.86(6 H,S,OCH3),4.53 (4 H,m,H一1,2),6.43(1
6 7J),7.65(2 H,d,J--8.4 ./--8.4 H,d,,/--16.0

Hz,H一25,7.00(4

H,d,./--8.4 Hz,H一6:8:4,,,

Hz,H-5,,9,),7.68(1

H,d,J--16.0

Hz,H一3’,7.99(2

H,d,

Hz,H一3,,,7’,);ESI—MS m/z:374.04([M+NH4]+);

1,3.二.氧.苯烯丙酰.5.甲基间苯二酚(2.56)
5-methyl-1,3-di—O-cinnamoyl dihydroxybenzene(2.56)

向反应瓶中加入苯烯丙酸(60
0.40

mg,0.40

mm01),二环己基碳二亚胺(83

mg,

mm01),无水二氯甲烷8 mL,在室温下搅拌20 min,出现白色混浊后,加
mg,o.16

入5一甲基间苯二酚(20

mm01),4-二甲氨基吡啶(DMAP)(4.9

mg,o.04

mm01),整个溶液在室温下反应过夜,抽滤除去不溶物,蒸去溶剂,脱溶得到白 色固体,柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯=10:1),分离得到白色固体45 mg,产率 为73%;mp:96-97。C(CHCl3);Rf(-E油醚/乙酸乙酯=3:1):o.5;1H NMR(400 MHz,
CD30D):6 2.41(3 H,S,CHs),6.61(2
H,d,J=16.0

Hz,H一2:2 7,),6.90(3

H,S,H一2,4, H,d,

6),7.43(6 H,m,H?6:7,,8:6,,,7,,,8’’,7.60(4 H,m,H一5:9,,5,,,9 7’,7.87(2
,/--1 6.0

Hz,H一3,,3’I);ESI—MS m/z:402.11([M+NH4]+);

1,3.二.氧.13.(4.甲氧基苯)烯丙酰卜5.甲基间苯二酚(2.57)
5-methyl-1,3-di一0-(4一methoxycinnamoyl)-dihydroxybenzene(2.57)

白色固体36 mg,产率为51%,产率为;mp:106--108。C(CHCl3);Rf(石油醚
/L酸乙酯=3:1):0.54;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.18(3 H,S,CHs),3.85(6
52

H,

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

S,OC胁),6.47(2
J--8.8

H,d,J--16.0

Hz,H一2,’2’’,6.88(3 H,S,H-2,4,6),6.90(4
H,d,J--8.8

H,d, H,d,

Hz,H一6,,8,,6”8’’,7.54(4

Hz,H一5:9,,5,,,9’,),7.81(2

J--16.0 Hz,H一3:3 7,);ESI-MS

m/z:462.09([M+NH4]+);

1,3-二一氧一【3.(2,4.二氯苯)烯丙酰卜5.甲基问苯二酚(2.58)
5-methyl-1,3-di-O-(2,4-dichlorocinnamoyl)-dihydroxybenzene(2.58)

白色固体56 mg,产率为67%;mp:160---162。C(CHCl3);Rf(;fi-油醚/L酸乙酯
=3:1):0.51;1H NMR(400 MHz,CD30D):6 2.41(3 H,S,CH3),6.59(2 Hz,H一2:2’,),6.91(3 H,S,H一2,4,6),7.33(2
J=2.0 H,d,J=16.4

H,d,J--2.0 Hz,H一8,,8 7’,7.48(2 H,d, H,d,,/=16.0 Hz,H-3',3 7,);

Hz,H一9:9’’,7.63(2 H,S,H一6,,6’’,8.19(2

ESI—MS m/z:423.1 6([M+NH4]+);

53

第二章咖啡酰李尼酸衍生物的设计及合成的初步研究

2.6参考文献
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extract

acid is



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[2】

Bouchet,Nathalie;Barrier,Laurence;Fauconneau,Bernard.Radical
scavenging activity and antioxidant properties of tannins

from

Guiera

senegalensis(Combretaceae).PhytotherapyResearch.1998,12,159—162. 【3】Hamauzu,Yasunori;Yasui,Hisako;Inno,Takenori;Kume,Chihiro; Omanyuda,Midori.Phenolic
viral activity of Chinese

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